背景技术
甘氨鹅脱氧胆酸钠，是一种胆汁酸盐，目前主要用于生化研究，可用作脂酶加速剂，阴离子去除剂和制备细菌培养基等。近些年来，科学家们研究发现，甘氨鹅脱氧胆酸钠不仅仅是一种参与膳食脂类、脂溶性营养素吸收的天然调节剂，同时也是人体内重要的信号分子，参与多个旁分泌和内分泌功能，与脂质和胆固醇水平的平衡有关，控制能量消耗和免疫系统的调节。如甘氨鹅脱氧胆酸钠对肝癌细胞有较强的细胞凋亡诱导作用，可用于肝癌生化和治疗研究。
甘氨鹅脱氧胆酸钠用于药物治疗研究，要求的纯度较高。现有技术制备的样品，以及市场上购买的甘氨鹅脱氧胆酸钠样品的HPLC纯度一般在95%~97%，难以达到大于98%的纯度，不能满足药物研究的质量要求。有厂家采用流体化学方法可以得到HPLC纯度大于98%甘氨鹅脱氧胆酸钠，但该方法对设备的要求较高，适用于g级制备，不利于大批量生产。甘氨鹅脱氧胆酸钠分离纯化的不足，可能是限制其医药用途的一个主要原因。如何获得高纯度的甘氨鹅脱氧胆酸钠成为目前亟需解决的难题。
纯化方法[1]
磷酸二氢钾缓冲溶液配制：3.4g磷酸二氢钾溶解于1L纯水中，滴加2mol/L的氢氧化钠溶液调pH值到7，再用磷酸调pH值到2.5。
洗脱剂的配制：取2L的无水甲醇、333.3mL的乙腈与1L上述配制好的磷酸二氢钾缓冲溶液混合搅拌均匀制备得到洗脱剂，待用。
将10g HPLC检测纯度为95%的甘氨鹅脱氧胆酸钠盐溶于20mL水中，用6mol/L的盐酸溶液调pH<2，有大量白色固体析出，过滤，滤饼用纯化水洗涤，干燥至恒重得到9.2g甘氨鹅脱氧胆酸粗品，用30mL的洗脱剂溶解待用。
反相C18硅胶用无水甲醇充分浸泡脱气后，重力沉降法装成层析柱，（甘氨鹅脱氧胆酸粗品与C18反相硅胶重量比为1:50，C18反相硅胶柱规格Φ20*400毫米），并以200mL甲醇洗脱后，再用200mL的洗脱剂洗脱。甘氨鹅脱氧胆酸粗品上柱，先用300mL洗脱剂洗脱，再用100mL 80%的甲醇水溶液洗脱，最后用100mL无水甲醇洗脱，洗脱过程在常温常压条件下进行，用10mL的三角瓶分段收集洗脱溶液，通过HPLC检测纯度>98%的洗脱溶液合并，减压回收溶剂，加50mL乙酸乙酯溶解，30mL水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩至恒重，得甘氨鹅脱氧胆酸6.8g，HPLC检测纯度为98.8%。
甘氨鹅脱氧胆酸纯品6.8g，溶于35mL乙酸乙酯中，滴加氢氧化钠的甲醇溶液（0.6g氢氧化钠溶解于10mL无水甲醇中），搅拌1小时，减压浓缩至恒重，得到6.9g白色固体的甘氨鹅脱氧胆酸钠盐，HPLC检测纯度为98.8%，纯化收率为69%。
参考文献
[1]药璞(上海)医药科技有限公司. 一种甘氨鹅脱氧胆酸钠的纯化方法:CN201810680013.6[P]. 2021-09-10.