叶酸杂质4是叶酸工业合成中的一种杂质，常温常压下为黄色固体粉末，具有显著的碱性和一定的吸湿性，它不溶于水但是可溶于醇类有机溶剂。叶酸杂质4可由2,4,5,6-四氨基嘧啶硫酸盐和1,1,3三氯丙酮在抗氧剂的作用下通过缩合反应制备得到，它在叶酸的工业合成中常用作杂质参照物。
制备方法
图1 叶酸杂质4的制备方法
现有文献报道了一种叶酸杂质4的制备方法，其合成路径包括以下步骤：A）以2,4,5,6-四氨基嘧啶硫酸盐与1,1,3-三氯丙酮为起始原料，在抗氧剂和溶剂存在下进行缩合反应，生成式（I）结构中间体；B）将该中间体通过酸水解反应转化为叶酸杂质4粗品，再经色谱纯化获得高纯度的式（II）结构叶酸杂质4。该工艺采用全新两步法路线，反应条件温和、起始物料廉价易得、步骤简洁且后处理简便，粗品收率可达70%以上。通过此方法获得的叶酸杂质4纯度高，适用于叶酸相关性质与合成机理的深入研究，有利于提升叶酸产品的质量控制水平。[1]
医药应用
叶酸杂质4是叶酸工业化合成过程中产生的一种典型工艺杂质，其在质量控制体系中常作为关键杂质参照物使用。叶酸在膳食中的重要性逐渐被认识，尤其是它在预防出生缺陷、心血管疾病、肿瘤和神经退行性疾病中的作用，已使其成为重要的微量营养素。叶酸在细胞增殖、促进人体生长发育及维护人体健康中具有重要作用，可以保证蛋白质与DNA的合成。在叶酸生产工艺开发与质量研究过程中，叶酸杂质4的对照品被广泛应用于杂质谱分析、合成路线优化、降解机理研究及药品稳定性评价等方面。
参考文献
[1] 陈建新,杨结合,黄博,等.一种叶酸EP杂质F的制备方法, 中国发明专利, 专利号：CN202010910277.3[P].
