(+)-生物素 4-硝基苯酯又称D-生物素对硝基苯酯，是一种重要的生物化学试剂，为白色至淡黄色结晶性粉末，在极性有机溶剂如二甲基亚砜、N,N-二甲基甲酰胺中具有良好溶解性，在水相介质中会发生缓慢水解。(+)-生物素 4-硝基苯酯分子中4-硝基苯酯部分相对稳定，但在适当条件下可发生水解或与其他亲核试剂反应，尤其是在弱碱性环境中，能与伯氨基快速形成稳定的酰胺键。
有机应用
1、3-O-[4-O-(生物素基-β-丙氨酰)-6-磺基-α-D-吡喃异鼠李糖基]-1-O-硬脂酰基-丙三醇(1-12)的制备：将化合物(1-11)(273.2mg,403umol)溶解于无水N,N-二甲基甲酰胺(20mL)和三乙胺(1mL)的混合溶液,添加(+)-生物素 4-硝基苯酯(162mg,443umol),在用搅拌器搅拌的同时于室温下反应24小时。确认反应已充分进行后,添加甲苯、甲醇进行共沸的同时在减压下蒸除溶剂进行浓缩。将所得残渣用硅胶色谱法(氯仿-甲醇-蒸馏水,40:10:1.2-70:30:2.6-30:10:1.5-65:25:4)纯化，得到标题化合物(1-12) {320.8mg,355umol,88.0%}[1]。
2、3-O-(6-磺基-α-)-吡喃异鼠李糖基)-1-O-(生物素基-β-丙氨酰)-丙-1,3-二醇钙盐(1-11)：将化合物(2-10)(226mg,0.57mmol)溶解于无水DMF(5mL)和三乙胺(2mL)的混合溶液,添加溶解有(+)-生物素 4-硝基苯酯(313mg,0.86mmol)的无水DMF(2mL)溶液,在用搅拌器搅拌的同时于室温下反应过夜。确认反应已充分进行后,添加甲苯、甲醇进行共沸的同时在减压下蒸除溶剂进行浓缩。将所得残渣用硅胶色谱法(氯仿-甲醇,10:1+1:4)纯化,得到钠盐体。将已用氯化钙水溶液交换成钙体的离子交换树脂(amberlite(注册商标)IR-120,15.7mL)填充于柱。使钠盐体水溶液反复通过柱来进行交换成钙盐体的操作,得到目标化合物[1]。
3、N-(2-(2-(2-(2-叠氮乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙基)-5-((3aS,4S,6aR)-2-氧代六氢-1H-噻吩并[3,4-d]咪唑-4-基)戊酰胺的制备：在室温下，向(+)-生物素 4-硝基苯酯(50mg,0.14mmol)的THF(1mL)溶液中加入11-叠氮-3,6,9-三氧杂十一烷-1-胺(27μL,0.14mmol)和三乙胺(57μL,0.41mmol)。室温搅拌12小时后，反应混合物用水(1mL)淬灭。将反应混合物用乙酸乙酯萃取三次，合并的有机相用饱和食盐水洗涤，经硫酸镁干燥，减压浓缩。残余物经硅胶快速柱色谱(甲醇/二氯甲烷=1:10)纯化，得到叠氮化物(30mg,49%)[2]。
参考文献
[1] 东洋水产株式会社. 具有肿瘤滞留性的化合物:CN201080004848.1[P]. 2011-12-14.
[2] INDIANA UNIVERSITY RESEARCH & TECHNOLOGY CORPORATION, GACHON UNIVERSITY OF INDUSTRY-ACADEMIC COOPERATION FOUNDATION. COMPOUNDS FOR TREATMENT OF ANGIOGENESIS-MEDIATED DISEASES:US2014036965W[P]. 2014-11-13.