(4-脒苯基)甲磺酰氟盐酸盐（常用缩写p-APMSF）是生化与分子生物学领域经典的丝氨酸蛋白酶不可逆抑制剂，核心靶向胰蛋白酶样丝氨酸蛋白酶，广泛用于酶学鉴定、细胞与组织蛋白提取、凝血/补体通路研究及水产繁殖机制研究，是替代PMSF、DFP的高选择性抑制剂工具药。
应用研究
1、祝妮检测了蛋白酶抑制剂对小菜蛾中肠酶活性的影响。当分别加入抑制剂(4-脒苯基)甲磺酰氟盐酸盐(APMSF)和L-1,4'-甲基磺酰基-2-苯基乙基氯甲基酮(TPCK)时总蛋白酶的活性受到抑制;当以胰蛋白酶作为底物时，(4-脒苯基)甲磺酰氟盐酸盐对胰蛋白酶有显著抑制作用，而L-1,4'-甲基磺酰基-2-苯基乙基氯甲基酮抑制作用有限;当以胰凝乳蛋白酶作为底物时，而L-1,4'-甲基磺酰基-2-苯基乙基氯甲基酮对胰凝乳蛋白酶有显著抑制作用，对胰蛋白酶抑制作用不明显。胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶活性的降低与基因转录水平的下降相一致，因此寄生后胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶活性的下降可能与丝氨酸蛋白酶基因转录水平的下降有关[1]。
2、Matsuwaki,Y.等人为探究上皮细胞对真菌的应答模式及其潜在作用机制。将人气道上皮细胞系BEAS-2B与Calu-3（均购自美国典型培养物保藏中心）分别与PAR-2多肽及多种真菌提取物共孵育，检测细胞的各项应答指标，包括粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）、白细胞介素6（IL-6）、白细胞介素8（IL-8）、嗜酸性粒细胞趋化因子、嗜酸性粒细胞趋化因子2及活化调节正常T细胞表达和分泌因子（RANTES）的分泌水平，以及细胞内钙离子浓度的变化。为明确参与该细胞应答的蛋白酶类型，实验使用了胃蛋白酶抑制剂A、嗜热碱性芽孢杆菌抑制剂（ATBI）、人类免疫缺陷病毒（HIV）蛋白酶抑制剂及(4-脒苯基)甲磺酰氟盐酸盐等多种蛋白酶抑制剂；同时通过PAR-2激动肽与拮抗肽，探究PAR-2在该过程中的作用[2]。
3、Ngernsoungnern等人为验证对虾释放到海水中的内源蛋白酶是否为卵激活所必需。研究让雌虾在添加了蛋白酶抑制剂的人工海水中产卵，结果发现，(4-脒苯基)甲磺酰氟盐酸盐（APMSF）和大豆胰蛋白酶抑制剂（SBTI）可显著抑制卵激活，高剂量的两种抑制剂处理下，卵的完全激活率仅为 1%~2%；且经APMSF和SBTI处理后的卵子即便后续清洗，其激活过程也无法恢复。与之相反，胃蛋白酶抑制剂A、半胱氨酸蛋白酶抑制剂E-64和乙二醇四乙酸等其他蛋白酶抑制剂对卵激活无抑制作用，经这些试剂处理的卵子完全激活率可达约98%。本研究结果表明，对虾释放到海水中的丝氨酸蛋白酶（极有可能为胰蛋白酶样蛋白酶）可能参与了斑节对虾的卵激活过程[3]。
参考文献
[1] 祝妮. 小菜蛾中肠丝氨酸蛋白酶基因的克隆、转录及其酶活的研究[D]. 浙江:浙江大学,2013.
[2] Matsuwaki,Y., Wada,K., White,T., et al. Alternaria fungus induces the production of GM-CSF, interleukin-6 and interleukin-8 and calcium signaling in human airway epithelium through protease-activated receptor 2[J]. International archives of allergy and immunology,2012,158(S1):19-29. DOI:10.1159/000337756.
[3] Ngernsoungnern, Piyada, Sretarugsa, Prapee, Ngernsoungnern, Apichart. Alteration of egg activation by protease inhibitors in the black tiger shrimp, Penaeus monodon[J]. Invertebrate Reproduction & Development,2015,59(4):206-211. DOI:10.1080/07924259.2015.1086827.