背景及概述
单甲基奥瑞他汀E（VcMMAE），CAS号474645-27-7，是海兔毒素10的合成衍生物，属于强效抗有丝分裂剂和抗肿瘤化合物，分子式为C₃₉H₆₇N₅O₇，分子量717.993。它由海洋无壳软体动物海兔中提取的毒性多肽改良合成，毒性约为长春碱的200倍，自身因毒性过高无法直接作为药物使用。单甲基奥瑞他汀E广泛应用于多种癌症治疗研究，相关ADC药物可用于淋巴瘤、白血病及实体瘤治疗，安全性可控，主要不良反应为外周神经病变，目前已成为ADC药物研发的核心成分之一。
作用机制
单甲基奥瑞他汀E核心作用机制是抑制微管蛋白聚合，破坏细胞骨架结构，阻断细胞有丝分裂，进而诱导癌细胞凋亡，还可通过膜渗透性对周围癌细胞发挥杀伤作用。作为抗体偶联药物（ADC）最常用的细胞毒性载荷之一，它通过连接子与单克隆抗体结合，精准靶向癌细胞，国际命名中含单甲基奥瑞他汀E的ADC药物名称均带有“vedotin”后缀。
制备
参考文献[1]报道单甲基奥瑞他汀E的制备工艺。
图1 单甲基奥瑞他汀E的合成反应式
方法一、
向搅拌下的单甲基奥瑞他汀E（MMAE，36mg，1.0当量）的N,N-二甲基甲酰胺（DMF，10倍体积）溶液中，加入mc-Val-Cit-PABC-PNP（1.1当量）、1-羟基-7-氮杂苯并三氮唑（HOPO，1.1当量）和2,6-二甲基吡啶（2,6-lutidine，2倍体积）。室温搅拌过夜后，采用制备型反相高效液相色谱（rp-HPLC）纯化（流动相：含0.05%甲酸的水与乙腈体系；色谱柱：YMCPackProC18，250×20mm，10μm）。收集主峰组分并冻干，得到单甲基奥瑞他汀E（65mg，收率98%）。其结构经氢核磁共振（¹HNMR，谱图与文献一致）和高分辨质谱（ESI，实测m/z=1316.7820；计算值[M+H]⁺1316.7864）确证。
方法二、
向搅拌下的NH₂-VC-PAB-MMAE（S3，20mg，17.8μmol）的DMF（200μL）溶液中，加入S23（4.5mg，21.3μmol）、2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐（HATU，8.1mg，21.3μmol）和N,N-二异丙基乙胺（DIPEA，6.2μL，35.6μmol）。反应液于25℃搅拌2h，液相色谱-质谱（LC-MS）监测显示反应完全。将反应液经半制备柱纯化，得到目标产物单甲基奥瑞他汀E（18.2mg，收率78%）。S24的HPLC分析（C18柱，方法A）保留时间为23.72min，纯度99%。ESI-MS计算值C₆₈H₁₀₅N₁₁O₁₅[M+H]⁺m/z=1316.7864，实测值m/z=1316.7849。
参考文献
[1]Current Patent Assignee: SIGMA ALDRICH - WO2021/183542, 2021, A1.Location in patent: Paragraph 0116-0117