BOC-L-天冬酰胺 4-硝基苯酯为N-叔丁氧羰基保护的L-天冬酰胺羧基活化衍生物，为肽合成领域常用的氨基酸活性酯。英文别名：Boc-Asn-ONp，白色结晶性固体，易溶于二氯甲烷、N,N-二甲基甲酰胺、乙酸乙酯等有机溶剂，微溶于水；对光敏感，需避光密封保存。
制备方法
第一步：BOC保护L-天冬酰胺的氨基
溶解：将L-天冬酰胺（1eq）溶于无水THF与水的混合体系（体积比3:1），冰浴冷却至0-5℃。
加碱与保护剂：缓慢加入三乙胺（1.2eq）调节pH至8-9，再逐滴加入二碳酸二叔丁酯（1.1eq）的THF溶液，维持温度0-5℃。
反应：冰浴反应1小时后，升温至室温（20-25℃）继续搅拌4-6小时，直至TLC（展开剂：乙酸乙酯/石油醚=1:1）检测原料点（L-天冬酰胺）消失。
后处理：减压浓缩除去THF，剩余水溶液用1mol/L盐酸调节pH至2-3，用乙酸乙酯萃取（3×50mL），合并有机相，用饱和食盐水洗涤（2×30mL），无水硫酸钠干燥，过滤后浓缩，得到白色固体BOC-L-天冬酰胺（收率约85-90%）。
第二步：羧基活化与4-硝基苯酯合成
溶解：将BOC-L-天冬酰胺（1eq）和4-硝基苯酚（1.2eq）加入干燥的二氯甲烷中，搅拌溶解，冰浴冷却至0℃。
加缩合剂：缓慢加入N,N'-二环己基碳二亚胺（1.1eq）的二氯甲烷溶液，搅拌均匀后，维持0℃反应2小时，再升温至室温反应12-18小时（避光，防止4-硝基苯酚降解）。
除杂质：反应结束后，过滤除去生成的二环己基脲（DCU，白色沉淀），滤液减压浓缩至干，得到BOC-L-天冬酰胺 4-硝基苯酯粗产物。
第三步：纯化与表征
重结晶纯化：将BOC-L-天冬酰胺 4-硝基苯酯粗产物溶于少量热乙酸乙酯，加入石油醚至溶液出现浑浊，冷却至0-5℃静置析晶，过滤得到白色针状晶体，重复1-2次以提高纯度。
柱层析纯化（可选）：若重结晶后纯度不足，采用硅胶柱层析，展开剂为乙酸乙酯/石油醚（体积比 2:1），收集目标馏分，浓缩后得到BOC-L-天冬酰胺 4-硝基苯酯纯品。
结构验证：通过薄层色谱（TLC，Rf值约0.4-0.5，展开剂：乙酸乙酯/石油醚=2:1）、熔点测定（文献值约158-160℃）、红外光谱（IR，特征峰：1750cm⁻¹附近为BOC羰基吸收，1600cm⁻¹附近为硝基吸收，1250cm⁻¹附近为酯键吸收）确认为BOC-L-天冬酰胺 4-硝基苯酯结构[1]。
参考文献
[1] BRUZZESE T, CEDRO A, VAN DEN HEUVEL H H. Peptides correlated to lysozyme: US 4784988(P). 1988-11-15.