FMOC-D-4-硝基苯丙氨酸（Fmoc-D-Phe(4-NO₂)-OH，CAS：177966-63-1）是D-构型苯丙氨酸的芳香族硝基取代衍生物，以N-α位芴甲氧羰基（Fmoc）为氨基保护基，是多肽合成（尤其Fmoc 固相合成）中构建含D-芳环残基序列的关键砌块，广泛用于药物化学、生物活性肽与手性探针的研发。
合成应用
1、大环四肽通过先固相合成线性前体、再液相环化的组合方法合成。线性多肽前体D-aa-Phe-D-Pro-Phe（其中D‑aa=D‑Trp(R)或D‑Phe (R)）按已有方法在2‑氯三苯甲基氯树脂上合成，并采用已报道的通用方法进行环化反应。将线性多肽前体，如FMOC-D-4-硝基苯丙氨酸、Fmoc-L-苯丙氨酸或Fmoc-D-脯氨酸（25mM，0.5当量）分步溶于DMF，以1mL/h的速率逐滴加入溶有0.75当量HATU与4当量DIEA的DMF溶液中（最终多肽浓度为0.6mM）。滴加完毕后，向反应液中直接补加第二份HATU（0.75当量）与4当量DIEA，再以相同速率（1mL/h）逐滴补加溶于DMF的线性多肽（25mM，0.5当量，最终多肽浓度1.2mM）。随后将反应液在室温下搅拌6–10h；若HPLC显示反应未完全，则补加适量HATU与DIEA，继续反应1h。减压蒸除DMF，加入二氯甲烷后滤去不溶性副产物，得到粗品环肽。采用快速柱层析纯化：以乙酸乙酯/石油醚体系进行线性梯度洗脱（10%–80%乙酸乙酯，15min，流速30mL/min）；馏分浓缩后，从乙腈水溶液中冻干得到纯品环肽。如亲水性更强的多肽17和18采用反相HPLC纯化，经冻干得到纯品[1]。
2、向51.3g（0.119mol）化合物FMOC-D-4-硝基苯丙氨酸的悬浮液（溶剂为800mL异丙醇与600mL水）中依次分批加入少量盐酸与锌粉。加热反应体系，原料逐渐溶解。通过薄层色谱（TLC）监测原料消耗情况。反应结束后，在减压、pH=1条件下蒸除体系中的异丙醇。将所得沉淀置于20%盐酸中回流煮沸6h。冷却后，所得悬浮液用乙酸钠水溶液中和至pH4–5。过滤收集沉淀并干燥。收率：化合物4a为89%，化合物4b为87%；熔点：4a为214–215℃，4b为218–219℃[2]。
参考文献
[1]Aldrich JV,Yakovlev DY,Coleman JS,Senadheera SN,Stacy HM,Eans SO,Knapp BI,Bidlack JM,McLaughlin JP.Optimization of the Macrocyclic Tetrapeptide[D-Trp]CJ-15,208 to Prevent Stress-Induced Relapse of Cocaine-Seeking Behavior. Molecules. 2025; 30(19):3993.https://doi.org/10.3390/molecules30193993
[2]Tolstyakov, V.V., Tolstobrova, E.S., Zarubina, O.S. et al. Synthesis of new tetrazolyl derivatives of L- and D-phenylalanine.Russ J Org Chem 52, 1681–1685 (2016). https://doi.org/10.1134/S1070428016110221