NA-P-甲苯磺酰-L-精氨酸甲酯盐酸盐是经典的丝氨酸蛋白酶特异性底物，广泛用于酶活测定与生化研究。NA-P-甲苯磺酰-L-精氨酸甲酯盐酸盐的英文名称：Nα-p-Tosyl-L-arginine methyl ester hydrochloride（缩写：TAME·HCl），白色结晶性粉末，易溶于水、甲醇；溶于乙醇、DMSO。其侧链胍基是与胰蛋白酶等酶活性中心结合的关键基团，因此常用于胰蛋白酶活性测定。
应用
1、专利CN202310602952.X提出了一种胰蛋白酶活性检测试剂，包括苯酚红、胰蛋白酶特异性底物和弱碱试剂；所述胰蛋白酶特异性底物为NA-P-甲苯磺酰-L-精氨酸甲酯盐酸盐(TAME·HCl)或BAEE·HCl。本发明还提出了一种胰蛋白酶活性检测方法，包括：(1)制备胰蛋白酶活性检测试剂；(2)预处理；(3)检测参比溶液，平均吸光度变化值记为Δ0；(4)标准品浓度记为C标；平均吸光度变化值记为Δ标；(5)待测组分的胰蛋白酶浓度记为C样；平均吸光度变化值记为Δ样；(6)U样＝U标*活性比值，活性比值＝[(Δ样‑Δ0)*稀释倍数/C样]/[(Δ标‑Δ0)*稀释倍数/C标]*100％。本发明的胰蛋白酶活性检测试剂和方法，其检测胰蛋白酶活性的准确度较高[1]。
2、杨代勤等人进行了黄鳝喜食的天然动物性饵料蚯蚓、鲢肌肉和配合饲料对黄鳝消化酶活性影响的比较研究。其中，胰蛋白酶活性的测定：以NA-P-甲苯磺酰-L-精氨酸甲酯盐酸盐(TAME)作底物,先将29.0mg TAME和222mg CaCl2溶于100mL 0.05mol/L、pH9.0 Tris-HCl缓冲液中,35℃预热,加入0.2mL粗酶液,立即混合均匀,并计时,于247nm波长处测吸光值(A),每隔30s读一次数,共计2min,根据时间-吸光值的关系曲线中的直线部分,任选一时间间隔与相应的吸光值的增量(△A)来计算胰蛋白酶活性。胰蛋白酶活性大小用1g新鲜组织在35℃、pH9.0条件下,1min内所产生的吸光值的变化量(增量)来表示[△A247・(g・min)-1][2]。
参考文献
[1] 上海品峰医疗科技有限公司. 一种胰蛋白酶活性检测试剂和活性检测方法:CN202310602952.X[P]. 2023-08-04.
[2] 杨代勤,严安生,陈芳,等. 不同饲料对黄鳝消化酶活性的影响[J]. 水产学报,2003,27(6):558-563. DOI:10.3321/j.issn:1000-0615.2003.06.009.