乙酰基四肽-2 (Acetyl Tetrapeptide-2) 是一种高效、温和的抗衰紧致类化妆品活性肽，核心作用是促进胶原蛋白与弹性蛋白合成、强化真皮结构、抗氧化抗炎，广泛用于抗皱、紧致、修护类护肤品。乙酰基四肽‑2是一种四个氨基酸组成的活性多肽，其序列为Ac‑D‑Lys‑Asp‑Val‑ L‑m‑Tyr‑NH2，是由胸腺生成素II的氮端(AA33～36)衍生而来的四个氨基酸肽链，其可以刺激角质细胞的生长和分化，可以有效加强皮肤免疫防御和促进表皮再生，增强皮肤系统免疫力。因此，多用于化妆品内开发抗衰老美容产品。
合成方法[1]
1、合成Fmoc‑L‑m‑Tyr(TBDMS)‑OH
(1)合成Fmoc‑L‑m‑Tyr‑OH
以水和乙腈的混合液为溶剂，将L‑m‑Tyr‑OH、芴甲氧羰酰琥珀酰亚胺、三乙胺在室温下进行反应，反应完后用盐酸调节pH<5，浓缩除去乙腈，用硫酸氢钾水溶液和乙酸乙酯萃取，对乙酸乙酯相进行浓缩，浓缩液用石油醚结晶并淋洗过滤，得到Fmoc‑L‑m‑Tyr‑OH。
(2)合成Fmoc‑L‑m‑Tyr(TBDMS)‑OH
以乙腈为溶剂，将Fmoc‑L‑m‑Tyr‑OH、叔丁基二甲基氯硅烷、N,N‑二异丙基乙胺在室温下进行反应，反应完成后用硫酸氢钾水溶液调节pH<5，浓缩除去乙腈，用硫酸氢钾水溶液和用乙酸乙酯萃取，对乙酸乙酯相进行浓缩，浓缩物柱层析纯化，得到Fmoc‑L‑m‑Tyr (TBDMS)‑OH。
2、合成Fmoc‑L‑m‑Tyr(TBDMS)‑Rink Amide‑AM Resin
以N,N‑二甲基甲酰胺为溶剂，将Rink Amid‑AM Resin、Fmoc‑L‑m‑Tyr(TBDMS)‑OH、1‑羟基苯并三唑、N,N‑二异丙基碳二亚胺在室温下进行反应，得到Fmoc‑L‑m‑Tyr(TBDMS)‑Rink Amide‑AM Resin。
3、合成Fmoc‑Val‑L‑m‑Tyr(TBDMS)‑Rink Amide‑AM Resin
将步骤2得到的Fmoc‑L‑m‑Tyr(TBDMS)‑Rink Amide‑AM Resin用哌啶的N,N‑二甲 基甲酰胺溶液脱除Fmoc保护基，得到H2 N‑L‑m‑Tyr(TBDMS)‑Rink Amide‑AM Resin；以N,N‑ 二甲基甲酰胺为溶剂，将H2N‑L‑m‑Tyr(TBDMS)‑Rink Amide‑AM Resin、Fmoc‑Val‑OH、1‑羟基苯并三唑、N,N‑二异丙基碳二亚胺在室温下进行反应，得到Fmoc‑Val‑L‑m‑Tyr(TBDMS)‑Rink Amide‑AM Resin。
4、合成Fmoc‑D‑Lys(Boc)‑Asp(OtBu)‑Val‑L‑m‑Tyr(TBDMS)‑Rink Amide‑AMResin
按照步骤2的方法在步骤3得到的Fmoc‑Val‑L‑m‑Tyr(TBDMS)‑Rink Amide‑AM Resin上连接Fmoc‑Asp(OtBu)‑OH，得到Fmoc‑Asp(OtBu)‑Val‑L‑m‑Tyr(TBDMS)‑Rink Amide‑AM Resin；然后按照步骤3的方法在得到的Fmoc‑Asp(OtBu)‑Val‑L‑m‑Tyr(TBDMS)‑ Rink Amide‑AM Resin上连接Fmoc‑D‑Lys(Boc)‑OH，得到Fmoc‑D‑Lys(Boc)‑Asp(OtBu)‑ Val‑L‑m‑Tyr(TBDMS)‑Rink Amide‑AM Resin。
5、合成Ac‑D‑Lys(Boc)‑Asp(OtBu)‑Val‑L‑m‑Tyr(TBDMS)‑Rink Amide‑AM Resin
将步骤4得到的Fmoc‑D‑Lys(Boc)‑Asp(OtBu)‑Val‑L‑m‑Tyr(TBDMS)‑Rink Amide‑ AM Resin用哌啶的N,N‑二甲基甲酰胺溶液脱除Fmoc保护基，得到H2N‑D‑Lys(Boc)‑Asp (OtBu)‑Val‑L‑m‑Tyr(TBDMS)‑Rink Amide‑AM Resin；然后将H2N‑D‑Lys(Boc)‑Asp(OtBu)‑ Val‑L‑m‑Tyr(TBDMS)‑Rink Amide‑AM Resin中加入二氯甲烷与乙酸酐、N,N‑二异丙基乙胺 的混合液，在室温下进行反应，得到Ac‑D‑Lys(Boc)‑Asp(OtBu)‑Val‑L‑m‑Tyr(TBDMS)‑Rink Amide‑AM Resin。
6、制备乙酰基四肽‑2
将Ac‑D‑Lys(Boc)‑Asp(OtBu)‑Val‑L‑m‑Tyr(TBDMS)‑Rink Amide‑AM Resin用四 丁基氟化胺的N,N‑二甲基甲酰胺溶液脱除TBDMS保护基，然后用切割液脱除Boc和OtBu保护基，过滤，将滤液加入冷的甲基叔丁基醚中析出乙酰基四肽‑2粗品，粗品经高效液相色谱纯 化、减压浓缩、冷冻干燥，得到纯度大于95％的乙酰基四肽‑2产品。
参考文献
[1] 陕西慧康生物科技有限责任公司. 一种乙酰基四肽-2的制备方法:CN201711218826.5[P]. 2021-06-04.