Masson三色染色液是一种基于阴离子染料分子大小差异实现组织选择性染色的经典特殊染色液。其核心原理是利用不同分子量的染料对组织渗透性的不同，小分子染料（如丽春红）可进入致密的肌纤维，而大分子染料（如苯胺蓝）只能渗入疏松的胶原纤维，从而将胶原纤维染成蓝色或绿色，肌纤维和细胞质染成红色，细胞核染成蓝黑色。这种鲜明的色彩对比，使Masson三色染色液在组织学研究和病理诊断中具有非常重要的价值。
主要应用
Masson三色染色在基础研究和临床病理诊断中应用广泛。最核心的应用是评估组织纤维化。在肝纤维化、肝硬化、肾纤维化、心肌纤维化（心肌瘢痕）等疾病模型中，它是定量或半定量评估纤维化程度的标准之一。在肿瘤鉴别诊断中，帮助区分纤维源性肿瘤和肌源性肿瘤，或用于判断肿瘤内纤维化程度。在肌肉疾病研究中，清晰地区分肌纤维与周围的结缔组织，用于观察肌肉疾病中的病理变化。
主要试剂组成
asson三色染色液包括以下核心成分，Weigert铁苏木素染液：用于细胞核染色，由A液和B液临用前等比例混合而成。丽春红-酸性品红染液：主要的红色染色剂。磷钼酸/磷钨酸溶液：关键的分化液，用于脱去胶原纤维上的红色染料。苯胺蓝或亮绿染液：用于胶原纤维的蓝色或绿色染色。弱酸溶液（如冰醋酸）：用于洗涤切片，增强色彩对比度和鲜艳度。
应用案例
在诊断肝纤维化中应用的研究中，经Masson三色染色液染色后，胶原纤维被染成鲜艳的蓝色，包绕呈红色的肝细胞团，颜色对比明显，分界清楚[1]。该研究纳入的89例慢性肝炎、肝硬化患者标本中，Masson三色染色液的诊断结果与临床诊断的吻合度达86例，显著高于HE染色的78例；尤其值得一提的是，有3例临床诊断为慢性肝炎-重度的患者，经Masson三色染色液染色后确诊为早期肝硬化[1]。这一发现充分说明，Masson三色染色液能更清楚地显示肝纤维化病变中的胶原纤维，提高早期隐匿性肝硬化的检出率，为临床早期干预提供了可靠的病理学依据。
宫颈微小浸润性鳞状细胞癌的精准诊断的研究中，Masson三色染色液能够清晰显示基底膜的变薄或缺损，其诊断效果与免疫组化染色无统计学差异[2]。在108例疑似宫颈微小浸润性鳞状细胞癌的标本中，Masson三色染色液检出70例微小浸润癌，而免疫组化检出60例，两者一致性良好[2]。更重要的是，Masson三色染色液操作简便、试剂成本低廉、染色时间短，尤其适合在快速冰冻切片中辅助HE染色进行即时诊断。对于医疗资源有限的基层医院，Masson三色染色液提供了一种经济实用的替代方案。
Masson三色染色液的应用边界正在不断拓展。研究发现了一个令人惊喜的现象：Masson三色染色液能够特异性标识不同阶段的凋亡肝细胞，且着色效果具有明显的阶段性差异[3]。经Masson三色染色液染色后，早期凋亡肝细胞的胞质被染成鲜艳的红色，胞核固缩呈深蓝色；而中、晚期凋亡肝细胞的胞质则呈现鲜艳的桔黄色，与早期凋亡细胞和未凋亡细胞形成鲜明对比[3]。相比之下，HE染色虽能显示早期凋亡细胞，但中晚期凋亡细胞与周围肝细胞难以区分；TUNEL染色虽然特异性高，但组织形态结构欠清晰，且无法标识无胞核的晚期凋亡细胞[3]。这一研究表明，Masson三色染色液不仅是一种胶原纤维染色液，更可能发展成为一种简单、廉价、可区分凋亡时相的原位细胞凋亡检测工具。
参考文献
[1] 侯舒倩, 肖瑶. Masson染色在辅助诊断肝纤维化中应用[J]. 中国实用医药, 2019, 14(13): 197-198.
[2] 赵娜, 杨建萍, 尹玉慧, 等. Masson染色在宫颈微小浸润性鳞状细胞癌诊断中的应用[J]. 河南医学研究, 2016, 25(1): 17-20.
[3] 黄利, 李利民. 利用Masson染色方法原位标识凋亡肝细胞效果观察[J]. 中药药理与临床, 2023, 39(10): 74-77.