介绍
叔丁氧羰基-D-叔亮氨酸中的叔丁氧羰基(tertbutyloxy-carbonyl,Boc)是氨基酸常用的N端保护基,经其保护后的氨基酸可以直接用于多肽药物的合成，因此制备叔丁氧羰基-叔亮氨酸(Boc-tertleucine)有利于叔亮氨酸进一步应用于多肽药物合成。Boc保护氨基酸的制备有以下几种方法:Boc-N3(Schnabel法)、Boc-Cl法、Boc-OC6H5法、叔丁氧羰基碳酸酐[(Boc)2O]法等。其中(Boc)2O法反应条件温和，操作简便，试剂经济易得，是实验室制备Boc保护氨基酸的常用方法。
图一 叔丁氧羰基-D-叔亮氨酸
合成
取叔亮氨酸对照品0.24 g(1.83 mmol),置于50mL的圆底烧瓶中,加蒸馏水15 mL溶解,用1 mol·L-1NaOH调节溶液pH值约为9，将其置于冰浴中，控制温度不超过10℃；称取(Boc)2O 0.479 g(2.19mmol)，溶于一定体积的有机溶剂中；在10℃左右滴加(Boc)2O的溶剂,边滴边搅拌，过程中用NaOH调节pH值保持在8~9左右，完成后继续低温搅拌2 h，之后缓慢升至室温；搅拌过程仍要严格控制pH；反应终止后减压蒸除有机溶剂，等体积乙醚萃取3次,弃去乙醚层;水层用稀盐酸中和至pH3，等体积乙酸乙酯萃取3次，合并有机层；再用0.1 mol·L-1盐酸洗涤，饱和氯化钠溶液洗至中性，无水Na2SO4干燥，蒸干得产品叔丁氧羰基-D-叔亮氨酸，称重并计算产物收率。采用四氢呋喃-水体系，溶剂配比为1:1(V/V),叔亮氨酸反应浓度为25mg·mL-1，室温反应约24 h,反应收率最高，可达90.63﹪。产物经硅胶柱层析后纯度较高，其结构经红外光谱和质谱鉴定。
对反应产物叔丁氧羰基-D-叔亮氨酸进行硅胶柱层析纯化,样品以乙酸乙酯溶解,上样量为1.0 mL(约0.14 mol),以乙酸乙酯:石油醚为1:1的洗脱剂洗脱,减压蒸发去除有机溶剂,置4℃冰箱低温结晶。Boc-tert-leucine:mp 119~121℃(对照品为118~121℃);MS(m/z):232[M+H]+;IR(KBr,cm-1)ν:3373(-NH-),1748,1721(-C=O-O),1160(-C=O-O),2972(-CH3),3345(-COOH),1661(-C=O-OH),1397,1368(-(CH3)3)[1]。
图二 叔丁氧羰基-D-叔亮氨酸的合成
参考文献
[1]梁才,罗晨,周雅琼,等.叔丁氧羰基-叔亮氨酸(Boc-tert-leucine)的合成研究[J].药学与临床研究,2011,19(03):282-283.DOI:10.13664/j.cnki.pcr.2011.03.002.