葡聚糖凝胶(R)G-200(Sephadex (R)G-200)是一种广泛应用于生物化学研究和工业纯化的分子筛介质,其独特的三维网状结构和分子筛效应使其成为蛋白质纯化、分子量测定等领域的理想工具。

结构性质
葡聚糖凝胶(R)G-200是由线性α-1,4-吡喃型葡聚糖与环氧氯丙烷在特定条件下进行交联反应,再通过丙三醇侧链连接形成的三维网状结构。这种结构具有珠状凝胶形态,呈白色珠粒或粉末状,具有高度亲水性;(R)G型葡聚糖凝胶通过调节交联度获得不同孔径,数字越大表示孔径越大;在水和电解质溶液中能迅速溶胀形成均匀凝胶,但不会溶解[1]。
交联度与分离范围密切相关,(R)G-200的"200"表示每克干凝胶在膨胀时可吸水20克,反映了其较低的交联度和较大的孔径。
葡聚糖凝胶(R)G-200展现出良好的化学稳定性,使其适用于多种生化环境,包括蛋白质纯化、核酸分离等需要温和条件的实验。
葡聚糖凝胶(R)G-200有不同的粒度等级,每种粒度适用于特定的分离需求。
a)超细级,用于需要极高分辨率的柱色谱和薄层色谱;
b)粗级和中级,用于制备性色谱过程,可在较低压力下获得较高流速;
c)粗级,还适用于批量工艺,提高分离效率。
颗粒大小直接影响分离效果和流速,粒径越大,分离分辨率越低但流速越快;粒径越小,分辨率越高但流速较慢。
应用领域
葡聚糖凝胶(R)G-200在生物化学研究和工业纯化中具有广泛应用。可去除蛋白质溶液中的盐离子,上样量可达柱床体积的20%,处理速度快;可有效去除药物中的高分子杂质,提高产品纯度;在药物纯化方面,(R)G-200已被证明可用于头孢他啶、头孢哌酮、头孢噻肟和头孢曲松等药物中高分子杂质的检测和去除[2]。
葡聚糖凝胶(R)G-200是测定生物大分子分子量的重要工具[3]。通过凝胶过滤层析分析蛋白质洗脱体积,结合标准蛋白质分子量-洗脱体积曲线确定分子量;可测定线性葡聚糖等大分子多糖的分子量分布。
参考文献
[1]裴若楠,翟红蕾,戚勃,郝淑贤,黄卉,杨贤庆.石花菜多糖的分离纯化及单糖组成分析[J].食品与发酵工业,2020,46(7):57-62.
[2]张稳,陶森林,苏红莹,贾庆明,陕绍云.葡聚糖水凝胶微球的制备与表征[J].功能材料,2017,48(2):2231-2235.
[3]Ake Wasteson,樊志萍,边玲.测定硫酸软骨素相对分子质量及其分布的方法[J].食品与药品,2012,14(5):225-227.