异麦芽三糖的检测与衍生化

2026/7/13 8:01:36 作者:流风

异麦芽三糖,英文名为Isomaltotriose,是一种三糖化合物,它的外观为冻干粉末且水溶性良好,该物质由三个D-葡萄糖单元通过α-1,6-糖苷键连接形成,含14个确定立构中心,可通过肠膜明串珠菌(Leuconostoc mesenteroides)NRRL B-512菌株的酶解反应制得。化学特性上异麦芽三糖具有还原性,耐淀粉酶及麦芽糖酶分解且不被酵母发酵。

检测方法

针对乳制品、固体饮料、糖果及保健品等食品中常见添加的功能活性成分——低聚异麦芽糖(包括异麦芽糖IG2、潘糖P、异麦芽三糖IG3和异麦芽四糖IG4),研究人员建立了一种高效液相色谱检测方法。该方法以水和乙腈为流动相,采用梯度洗脱方式,经氨基色谱柱分离后,利用蒸发光散射检测器(ELSD)对食品中添加的低聚异麦芽糖含量进行测定。在方法学验证中,异麦芽三糖的线性工作范围为0.2~0.65 mg/mL,线性相关系数R²为0.9998;同时,异麦芽三糖在不同类型食品基质中的加标回收率也处于98.0%~105.0%之间,与其余三种低聚异麦芽糖一致,表明该方法对异麦芽三糖具有较高的准确度。此外,异麦芽糖、潘糖、异麦芽三糖和异麦芽四糖的线性相关系数R²分别为1、0.9999、0.9998和0.9999,线性关系良好。在精密度方面,室内重复性变异系数除含量较低的异麦芽四糖外均低于10%,室间再现性变异系数也普遍低于10%,说明方法的重复性和再现性均表现良好。 [1]

衍生化反应

异麦芽三糖的衍生化反应

图1 异麦芽三糖的衍生化反应

将异麦芽三糖和三乙胺(5当量)溶于D₂O/乙腈(4:1,270 mM)中,将混合物冷却至0°C,加入2-叠氮-1,3-二甲基咪唑啉六氟磷酸盐(3当量)。反应3小时后,向反应混合物中加入炔烃(2当量)、CuSO₄·5H₂O(1.5 mol%)和L-抗坏血酸(0.2当量),然后将反应混合物在50°C下搅拌14小时。反应结束后,将反应混合物浓缩,残余物溶于乙醇(20 mL)中,通过硅藻土过滤,滤液减压浓缩,再重新溶于水,用二氯甲烷洗涤,然后通过Amberlite® IR120(H⁺型,预先用1 M NaOH溶液处理)离子交换柱过滤,最后经Sephadex G-25凝胶过滤柱(8.7 × 1.7 cm,预先用0.01%氨水平衡并洗脱)纯化,得到目标产物。[2]

参考文献

[1] 傅博强王晶唐治玉王远兴谢明勇付芳圆.食品中低聚异麦芽糖高效液柑色谱检测方法研究[J].食品工业科技,2010,31:388-391,395.

[2] Protecting-Group-Free One-Pot Synthesis of Glycoconjugates Directly from Reducing Sugars, Lim, David; et al, Angewandte Chemie, International Edition (2014), 53(44), 11907-11911.

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