尿苷-5'-三磷酸三钠盐的合成

2026/7/31 8:00:51 作者:棋桦

尿苷 -5'-三磷酸三钠盐(UTP 三钠盐)是核苷酸类关键生化试剂,白色粉末,易潮解,不溶于乙醇。主要用作‌RNA 转录原料‌及‌细胞信号传导研究工具‌。‌‌

主要用途与功能

1 ‌生物合成原料‌:细胞内 RNA 转录的直接底物,也是合成 CTP(胞苷三磷酸)的前体。

2 ‌信号传导研究‌:作为细胞外配体激活 P2Y 受体(如 P2Y2、P2Y4、P2Y6),参与神经传导、炎症调节等过程。

3 医药中间体‌:用于合成地夸磷索钠等核苷酸类药物,或作为系统适用性实验的化学对照品。

4 代谢通路研究‌:参与糖核苷酸代谢及木糖补救途径等生化机制研究。

合成方法

使用Dowex-50W离子交换柱(吡啶鎓型)将无机焦磷酸的钠盐以及核苷二磷酸和三磷酸转化为相应的吡啶鎓盐。用稀四丁基氢氧化铵溶液将所得溶液滴定至pH 7.0。通过高真空旋转蒸发将反应混合物浓缩至原体积的约七分之一。将反应混合物冻干。将冻干粉末溶解于乙腈中进行干燥。向混合物中加入等量的干燥甲苯。通过旋转蒸发将溶液浓缩至干(重复3次)。假设焦磷酸为二(四丁基铵)盐。将残留物置于高真空下1小时。在氩气氛围下取出烧瓶。在4 Å分子筛存在下,将混合物溶解于干燥的二甲基甲酰胺中。在进行偶联反应前,让溶液静置至少1小时。向5-NMP (Bu4N+)1.7 (0.27 mmol) 或 5' NDP (Bu4N+)2.1 (0.27 mmol) 的溶液中,随后加入磺酰亚胺唑盐(0.32 mmol,120 mg)。在室温下搅拌反应混合物 1 分钟。将该溶液加入到受体(核苷单磷酸、二磷酸和糖磷酸为 0.405 mmol, 焦磷酸和二氟亚甲基双磷酸盐为0.54 mmol)及氯化镁(0.27 mmol,26 mg)的溶液中,该受体溶液溶于4 mL干燥的二甲基甲酰胺中,并在0 °C(冰浴)下分30秒加入。将混合物从冰浴中取出。在室温下搅拌反应混合物30分钟。将混合物冷却至 0 °C(冰浴)。加入 50 mM 乙酸三乙基铵缓冲液(5 mL,pH 7.0)淬灭反应混合物。用氯仿(3 × 10 mL)洗涤反应混合物。向混合物中加入 Chelex 树脂(约 0.2 g)。搅拌混合物 1 分钟。通过棉塞过滤混合物。加入水淬灭反应混合物,以避免产物沉淀。在氯仿洗涤之前将 Chelex 树脂加入混合物中。用反相高效液相色谱(RP-HPLC)纯化滤液[40分钟内从100%缓冲液(pH 7.0)线性梯度洗脱至5% CH3CN-95%缓冲液],随后通过Dowex-50-W-Na+离子交换柱。合并含有目标产物的各分馏液。通过高真空旋转蒸发浓缩产物。将残留物溶于水中。将产物冷冻干燥。使用 Na+ 型 Dowex-50-W 离子交换树脂,将所得白色粉末转化为尿苷 -5'-三磷酸三钠盐。[1]

尿苷 -5'-三磷酸三钠盐的合成.jpg

参考文献

[1] Mohamady, Samy; et al Sulfonyl Imidazolium Salts as Reagents for the Rapid and Efficient Synthesis of Nucleoside Polyphosphates and Their Conjugates Organic Letters (2012), 14(1), 402-405

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