介绍
精胺四盐酸盐是生物内源性多胺精胺的四盐酸盐形式，又被称为三亚乙基四胺四盐酸盐，具有较强吸湿性，易溶于水、微溶于乙醇，不溶于乙醚、氯仿等多数有机溶剂，化学性质稳定，分子内多个质子化氨基可通过静电相互作用结合带负电荷的核酸与蛋白质。它是生化与分子生物学研究的常用试剂，可用于沉淀纯化核酸、稳定DNA/RNA空间结构、提取组蛋白与染色质组分，也可作为细胞培养添加剂调控细胞增殖与膜完整性。同时在多胺生理功能研究、抗肿瘤机制研究及医药中间体合成中也有应用。
图一 精胺四盐酸盐
精制步骤
在步骤I中，通过在水和TBME的存在下搅拌，将三亚乙基四胺(标称量为125kg)装入反应器中，然后装入TBME(185±5kg)。添加水(约28kg)，搅动≥15分钟，同时将温度保持在≤30℃。如果需要，在25‑35 ℃下搅拌的同时，在溶液中接种三亚乙基四胺水合物(约0.1kg)，以促进结晶。在25‑35℃下添加异丙醇(64±1kg)。将悬浮液在30‑40℃加热≥15分钟，然后在≥90分钟的时间内缓慢冷却至15‑25 ℃。将悬浮液冷却至‑5‑5℃，并搅动≥30分钟。将产品过滤并离心。然后，提取样品进行分析(GC测定)并确定杂质。如果样品足够纯，则将湿的TETA水合物装入干燥机中，并在≤25℃的温度下干燥，直到满足下一步骤规定的要求。将三亚乙基四胺(TETA)转化为相应的三亚乙基四胺水合物(TETA水合物)。
步骤Ⅱ生产粗制三亚乙基四胺四盐酸盐(粗制TETA .4HCl) 。将三亚乙基四胺水合物(TETA水合物)溶于水(85±1kg)中，并在≤40℃下，用历时≥1小时供料的浓盐酸水溶液(200±5kg)酸化。检查pH值(目标pH＝1 .0)，并加入浓盐酸水溶液直至pH≤1 .0。将反应混合物冷却至15‑25℃，并搅拌≥10分钟。用乙醇(672±5kg)处理溶液≥1 .5h，并保持温度在≤30℃。将悬浮液冷却至‑5‑5℃，并搅动≥30分钟。过滤产品，并依次用乙醇(1x20kg，然后3x25kg)洗涤固体。将粗制三亚乙基四胺四盐酸盐(粗制TETA .4HCl)溶于水(340±10kg)。 [0321] ·用乙醇(909±10kg)处理溶液≥1 .5小时，并将温度保持在≤30℃。将悬浮液冷却至‑5‑5℃，并搅拌≥30分钟。过滤产品，并依次用乙醇(1x14kg，然后3x15kg)洗涤固体。从纯水和乙醇的混合物中重结晶粗制三亚乙基四胺四盐酸盐(粗制TETA 4HCl)。在B型晶种存在下， 通过从纯水和乙醇的混合物中重结晶来进一步纯化粗制精胺四盐酸盐(粗制TETA 4HCl)，以得到三亚乙基四胺四盐酸盐(TETA 4HCl)。
步骤III生产精胺四盐酸盐(TETA .4HCl) 。粗制精胺四盐酸盐(粗制TETA .4HCl)溶于水(340±10kg)。用乙醇(909±15kg)处理溶液，所述乙醇供料历时≥1 .5小时，保持温度在7‑13 ℃。在添加乙醇期间，将溶液用TETA .4HCl(2wt％)接种。 将悬浮液搅拌≥5小时，然后冷却至‑5℃并搅拌≥30分钟。过滤产品，并依次用乙醇(1x14kg，然后3x15kg)洗涤固体。通过GC分析产品样品的纯度。产品在≤40℃的温度下干燥，如果满足干燥失重的控制参数，则将产品研磨。研磨后的原料药在氮气下转移到双层食品级聚乙烯袋中，然后放入铝袋中并密封。铝袋插入HDPE鼓中。通过GC测试重结晶后获得的TETA 4HCl的杂质。如果杂质水平太高，则可以重复步骤III。
该方法从125kg的TETA中批量生产110‑130kg的TETA 4HCl。包括两次重结晶的粗制精胺四盐酸盐的合成的总收率为约50％[1]。
图二 精胺四盐酸盐的精制步骤
参考文献
[1]奥法兰股份公司.三亚乙基四胺四盐酸盐的晶形及其医药用途:202411423442.7[P].2025-01-14.