Fmoc-L-苏氨酸是一种保护型的氨基酸类衍生物，常温常压下为白色结晶颗粒或结晶粉末，它不溶于水但是可溶于醇类有机溶剂和二甲基亚砜。Fmoc-L-苏氨酸常用作生物合成基础化学试剂，在生物化学基础研究领域中可用于生物大分子例如多肽和蛋白质的制备。
制备方法
图1 Fmoc-L-苏氨酸的制备方法
在室温条件下，将Fmoc-O-N(CH3)-Bz（1.2当量，447 mg）溶于1.5 mL二氧六环所得溶液，逐滴加入到含有H-AA-OH（1.0当量，1.0 mmol）和碳酸氢钾（1.5当量，150 mg）的水（3 mL）与二氧六环（1.5 mL）混合溶剂的搅拌体系中，滴加完毕后继续搅拌反应12至36小时；待反应完成后，加入0.5 N盐酸淬灭反应，并用乙酸乙酯萃取三次，合并有机相，依次用饱和食盐水洗涤、无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩除去溶剂，所得粗产物经柱层析纯化（以二氯甲烷/甲醇=10:1，体积比作为洗脱剂），得到目标化合物Fmoc-L-苏氨酸。[1]
缩合反应
图2 Fmoc-L-苏氨酸的缩合反应
向一个25 mL圆底烧瓶中依次加入Fmoc-L-苏氨酸（0.2 mmol）、碱（0.44 mmol）、手性氨基酯底物（0.24 mmol）以及二氯甲烷（5.0 mL），随后将所得的反应混合物在冰浴下冷却至0度的条件下，向该混合体系中加入N-磺酰基咪唑鎓盐（0.24 mmol），并将所得的反应混合物在该温度下持续搅拌5分钟，之后再移至室温继续搅拌10至30分钟。反应完毕后往上述反应混合物中缓慢地加入水淬灭反应，然后将所得的反应混合液用二氯甲烷萃取三次（每次10 mL），合并有机相并将其用无水硫酸钠进行干燥处理，减压蒸除溶剂后，将所得的反应残余物通过硅胶柱快速层析进行纯化即可得到目标产物分子，洗脱剂采用二氯甲烷与甲醇的体积比为100:1的混合溶剂。[2]
参考文献
[1] Zhao, Yu; et al, Development of Fmoc-O-N(CH3)-Bz as a novel Fmoc protecting reagent for the preparation of various Fmoc-protected amino acids. Tetrahedron Letters (2025), 162, 155587.
[2] Li, Hongyun; et al, N-Sulfonyl Imidazoliums as the Versatile Coupling Reagents and Sulfonating Reagents in Synthesis of Amides, Esters, Thioesters, Phosphoramides, Phosphoesters, Glycosides, Sulfonamides, and Sulfonates, Chemistry - A European Journal (2025), 31(33), e202501206