苯霜灵(N-苯乙酰基-N-2,6-二甲苯基-DL-丙氨酸甲酯,benalaxyl)是内吸性杀菌剂,用于防治葡萄的单轴霉菌,马铃薯、草莓、番茄的晚疫菌,烟草、洋葱、大豆的霜霉菌,黄瓜的假霜霉菌等。分子中含有一个手性碳原子,具有一对对映异构体。目前苯霜灵仍以外消旋体的形式生产和使用,未见有单一对映体的相关研究。
本文使用高效液相色谱法实现了苯霜灵对映体的拆分,建立了分析方法,并对方法的有效性进行了验证。另外对残留于土壤、水、葡萄样本中微量的苯霜灵进行了残留分析,建立了提取、净化、检测方法。相关研究可为苯霜灵单一异构体的研究如杀菌活性、毒性毒理、代谢、环境残留等奠定基础。
高效液相色谱法
1、称取阴干土壤25g,置于250mL锥形瓶中,加入10mL去离子水。加入一定体积苯霜灵溶液(异丙醇溶剂),振荡平衡1h,加入50mL丙酮,0.02g活性碳,振荡1h,静置,将上层溶液抽滤,剩余残渣用20 mLx2丙酮再次提取,合并提取液,40℃旋转蒸发,剩余溶液转移至分液漏斗,加入5mL饱和NaCl溶液,用30、20和15mL二氯甲烷提取3次,合并提取液,旋转蒸发近干,氮气吹干后用异丙醇定容1mL,待测定。
2、自来水100mL,加入一定体积苯霜灵溶液,摇匀,静置1h。
3、C18固相萃取小柱先后用5mL超纯水、5mL甲醇、5mL超纯水活化，水样以约1mL/min流速过柱，以10mL超纯水洗涤,真空抽干0.5h。用5mL无水甲醇洗脱,收集洗脱液,35℃氮气吹干,异丙醇定容1mL。
4、称取捣碎葡萄样本25g于250mL锥形瓶中,加入苯霜灵溶液后振荡平衡1h,加入40mL乙腈,振荡1h,抽滤上清液,残渣用乙腈20mLx2提取,合并提取液,40℃减压浓缩,剩余液体转移至250mL分液漏斗中，加入5mL饱和NaCl溶液,用30、20和15mL二氯甲烷萃取,经无水硫酸钠干燥，减压浓缩近干,异丙醇定容1mL,待测。
在对映体水平上建立了苯霜灵的常量及残留分析方法,可有效检测苯霜灵的光学纯度及环境样本中的残留,方法相对简单。所使用的残留提取方法可得到较好的回收率,在提取水样本时使用了SPE法,避免了大量有机溶剂的使用。乙腈提取葡萄样本的杂质少,减少了检测过程中的干扰。本文可为研究苯霜灵单一异构体的毒性毒理、代谢、残留、降解等奠定基础[1]。
参考文献
[1]王鹏,刘东晖,王玉红,等. 高效液相色谱法拆分苯霜灵对映体[J]. 分析化学,2006,34(11):1524-1528. DOI:10.3321/j.issn:0253-3820.2006.11.003.