CHGA抗体所识别的对象,是神经内分泌细胞颗粒中含量最高的可溶性蛋白之一。由14号染色体上的CHGA基因编码,相对分子质量48000~52000,由439个氨基酸组成[3]。它同时是多种生物活性肽的前体,可被蛋白水解酶加工为血管抑素、胰抑释素(CHGA250-301)与儿茶酚抑素(CHGA352-372)等片段[3]。CHGA抗体是神经内分泌研究与诊断中的核心工具,广泛应用于神经内分泌肿瘤、癌症研究以及心血管与代谢研究。

在重症医学中,纳入143例脓毒症患者,按严重程度分为脓毒症组20例、严重脓毒症组62例与感染性休克组61例,于入院24 h内采集静脉全血、分离血浆后置负80℃保存,以放射免疫法测定血浆CHGA浓度[1]。感染性休克组血浆CHGA显著高于另外两组,严重脓毒症组又显著高于脓毒症组。血浆CHGA与肌红蛋白(r=0.48)、肌钙蛋白I(r=0.294)及NT-proBNP(r=0.348)呈正相关,与CK-MB无显著相关,与APACHE Ⅱ评分亦呈正相关(r=0.270)[1]。这篇研究为CHGA抗体提供了临床纵向读数的参照系。
使用CHGA抗体以酶联免疫吸附法检测血浆CHGA,比较2型糖尿病合并非酒精性脂肪肝组74例、单纯2型糖尿病组76例与正常对照75例。血浆CHGA在合并脂肪肝组为83.15±9.46 μg/L,单纯糖尿病组为70.90±2.75 μg/L,均高于正常对照的46.74±8.15 μg/L。在合并脂肪肝人群中,CHGA与脂肪组织三酰甘油脂肪酶呈负相关、与游离脂肪酸呈正相关,多元逐步回归显示空腹胰岛素、游离脂肪酸与ATGL是影响CHGA水平的因素[2]。
以重组人CHGA免疫BALB/c小鼠,经杂交瘤技术获得22株单克隆抗体,并利用CHGA抗体以方阵ELISA筛出XA332.7与XA332.22这一对组合。XA332.7作包被抗体、工作浓度10 μg/mL,XA332.22经HRP标记后作检测抗体、最佳稀释度1:32000[3]。该体系在0.78~25 ng/mL范围内线性良好(R²>0.99),检测下限0.439 ng/mL,批内变异系数小于10%、批间小于15%,回收率介于80%~120%[3]。
综上,为CHGA抗体制定核对手续时,有四项参数要确定。第一是表位归属,CHGA有多个酶切位点,免疫原落在全长序列还是胰抑释素、儿茶酚抑素等片段附近。第二是基质适配,同一CHGA抗体在血浆与唾液中的稀释线性与回收率需分别标定,不能凭一次验证通用。第三是量程覆盖,选型时须先确认量程能否覆盖预期样本。第四是配对与批间一致性,包被与检测抗体须成对验证,单克隆组合的批间变异是纵向随访能否成立的前提。
参考文献
[1] 陈晓迎, 张丹, 谢明, 等. 嗜铬粒蛋白A与脓毒症心肌损伤标志物的相关性分析[J]. 中国急救医学, 2016, 36(6): 495-498.
[2] 刘玉清, 邸阜生, 贾国瑜, 等. 糖尿病脂肪肝患者血浆CHGA与ATGL水平相关性研究[J]. 天津医药, 2014, 42(1): 13-16.
[3] 单尼奇, 刘善收, 王玉玲, 等. 唾液样本CHGA夹心ELISA方法的建立及其在应激检测中的初步应用[J]. 细胞与分子免疫学杂志, 2025, 41(4): 324-330.