简述
瑞特染色剂又名瑞氏染色液,瑞氏染料等,是一种久经考验的血液细胞染色剂,广泛用于血液涂片与骨髓涂片的染色[1]。以其为主要检测试剂的瑞特染色是实验诊断中重要的染色方法,特别在血液病的诊断上有其重要意义。瑞特染色原理如下:瑞特染色剂由酸性染料伊红和碱性染料亚甲蓝溶解于甲醇而成。不同的细胞因所含化学成分不同,对各种染料的亲和力也不同。其中,碱性(阳离子)染料能与细胞内酸性物质,如核酸(DNA和RNA),核蛋白,嗜碱性颗粒,中性颗粒等阴离子结合染成蓝灰色。酸性(阴离子)染料能与细胞内碱性物质,如血红蛋白,嗜酸性颗粒等阳离子结合染成橘红色[2]。

制备方法[3]
目前,瑞特染色剂的配制方法分为人工配液、机械配液两种。人工配液步骤如下:采用人工研磨振荡孵育法(A组)或人工研磨孵育混配法(B组),将若干份理论配方(瑞氏色素0.1 g,甲醇60 ml)的瑞氏色素放在清洁干燥的乳钵里。A组染料直接将瑞氏色素和甲醇加入棕色玻璃瓶中,研磨,每天振荡,温箱放置,于37℃孵育7 d。B组染料将瑞氏色素放入洁净干燥的研钵内,加入少许甲醇,研磨。将已溶解的染料倒入棕色玻璃瓶中,未溶解的再加少量甲醇研磨,直至染料完全溶解,放置于37℃恒温温箱内,每天振荡混合若干次,孵育7 d得瑞特染色剂。
机械配液步骤包括:应用瑞氏染液混配机,将瑞氏色素盛放于洁净的玻璃漏斗中,用甲醇将瑞氏色素完全冲入混配罐中,密封后将混配罐安装于水箱内水平转动轴的转环上,启动电机减速带动混配罐在37℃恒温的水中翻转(翻转速度以水面波浪大小适宜为度,避免水外溢),使混配罐中的粉粒状瑞氏色素借助混配罐内壁摩擦撞击及研磨材料的旋转碰撞分散溶解,运转3 d后混配成为瑞特染色剂(C1为瑞氏染液20μl+甲醇10 ml,C2为瑞氏染液40μl+甲醇10 ml),移放于棕色玻璃瓶中存放备用。
应用
医学检测技术领域报道了一种瑞氏吉姆萨复合染液及其制备方法,该复合染液包括如下组分:瑞特染色剂,吉姆萨染料,甲醇,甘油,表面活性剂。在制备该复合染液的过程中加入表面活性剂,能够加速染料溶解以及染色过程中染料小分子进入细胞的速度,因此该染色液成熟所需时间短,只需放置2d就可使用,使用该复合染液进行染色时,只需染2-3min便能达到良好的染色效果,很好地实现了在保证对血细胞染色清晰,胞质,颗粒,核等着色效果好的前提下,缩短染色时间,进而缩短诊断时间,配合仪器使用可以提高染片效率的目的[4]。
参考文献
[1]梁维冈.介绍一种改良的瑞氏(Wright's)染色液配制方法[J].陕西新医药, 1979.
[2]臧志伟.改进瑞特氏染色法[J]. 2021.
[3]刘志兰,赵宝忠.瑞氏染液混配机的设计[J].生物医学工程与临床,2009,13(1):67-70.
[4]周永杨,张娟,王丽钧.一种瑞氏-吉姆萨复合染液及其制备方法:CN201910162711.1[P].