小鼠嗅鞘细胞试剂盒的应用

2020/10/18 17:56:53

背景[1-5]

小鼠嗅鞘细胞试剂盒适用于分离培养小鼠嗅鞘细胞。利用小鼠嗅鞘细胞试剂盒中提供的嗅鞘细胞组织分离体系来分离,EDTA/EGTA处理过的嗅鞘细胞组织能使得神嗅鞘组织细胞的一些功能特性发生改变,从而将嗅鞘细胞分离开来。嗅鞘细胞(olfactoryensheathingcells,OECs)存在于嗅神经及嗅球的神经层上,沿嗅神经的全长,从周围神经系统到中枢神经分布。功能上介于施旺细胞和少突胶质细胞之间的一种特殊的胶质细胞,具有神经营养、抑制胶质增生、瘢痕形成、成鞘作用等。为轴突生长提供了适宜的微环境及较强的迁移的特性,使其成为促进中枢神经再生的理想候选细胞之一。

嗅鞘细胞是目前所发现的极少数的中枢神经系统可以再生细胞之一。其特点为终身具有神经再生功能,还能够释放多种神经营养因子、神经粘附分子,被认为是髓鞘化能力最强的胶质细胞。小鼠嗅鞘细胞分离自嗅球组织;嗅鞘细胞(OECs)是在功能上介于施旺细胞和少突胶质细胞之间的一种特殊的胶质细胞,具有神经营养、抑制胶质增生、瘢痕形成、成鞘作用等;为轴突生长提供了适宜的微环境及较强的迁移的特性,使其成为促进中枢神经再生的理想候选细胞之一。

嗅鞘细胞是目前所发现的极少数的中枢神经系统可以再生细胞之一,其特点为终身具有神经再生功能,还能够释放多种神经营养因子、神经粘附分子。被认为是髓鞘化能力最的胶质细胞,逐渐用于治疗脊髓损伤。嗅鞘细胞与胶质细胞、雪旺细胞在表现型上有共同点,它们都能促进轴突的再生,主要区别在于嗅鞘细胞不但存在于中枢神经系统,也存在于外周神经中。

嗅鞘细胞被认为是一种可塑性很高的细胞,它可表现出多种细胞形态和细胞表面标志,在嗅系统发育过程中,嗅鞘细胞根据其在组织定位的不同而有不同的抗原表型,其中P75NTR、GFAP、和O4可标记大部分在体嗅鞘细胞,然而在嗅球外神经层O4阳性嗅鞘细胞仍然可以在P75NTR阳性细胞层内分化成E-NCAM阳性的细胞层,还有一定比率的嗅鞘细胞P75NTR阴性而NY和S100表型为阳性。嗅黏膜中的神经元是生后才生长并在成年时继续分化的神经元,寿命为4-12周,随着新细胞的生长,又建立了新的神经支配关系。嗅鞘细胞存在于嗅神经及嗅球的神经层上,沿嗅神经的全长,从周围神经系统到中枢神经分布。

应用[6][7]

小鼠嗅鞘细胞试剂盒可用于嗅鞘细胞及其相关细胞培养的基础性研究:

小鼠嗅鞘细胞(OECs)体外培养的不同方法,为获取数量多,活性好,形态优的嗅鞘细胞提供一定的实验基础。方法:4只出生2~3个月的BALB/c小鼠,经枕骨大孔取嗅球,剥离嗅球外周两层制成细胞悬液。采取未纯化培养对照组、一次差速贴壁结合阿糖胞苷(Ara-c)纯化与多聚左旋赖氨酸包被培养板培养组(纯化包被组)和一次差速贴壁结合Ara-c纯化与未用多聚左旋赖氨酸包被培养板培养组(纯化未包被组)分别培养小鼠OECs,观察其原代和传代培养的细胞生长状况及形态,并进行免疫细胞化学鉴定。

结果:纯化未包被组OECs早中期无论数量还是形态都优于纯化包被组,而未纯化对照组的OECs早中期数量明显优于纯化组。大鼠嗅鞘细胞(olfactory ensheathing cells,OECs)体外培养的不同方法,为获取数量多、活性好、形态优的嗅鞘细胞提供一定的实验基础资料。

方法:2只出生2~3个月的SD(Sprague Dawley)大鼠,经枕骨大孔取嗅球,剥离嗅球外周两层制成细胞悬液。采取一次差速贴壁结合阿糖胞苷(Ara-c)纯化与多聚左旋赖氨酸包被培养板培养(纯化包被组)和一次差速贴壁结合Ara-c纯化与未用多聚左旋赖氨酸包被培养板培养(纯化未包被组)分别培养大鼠OECs,观察其原代和传代培养的细胞生长状况及形态,并进行免疫细胞化学鉴定。

结果:纯化包被组大鼠OECs无论数量还是形态都优于纯化未包被组。

参考文献

[1]Effect of epidural stimulation of the lumbosacral spinal cord on voluntary movement,standing,and assisted stepping after motor complete paraplegia:a case study[J].Susan Harkema,Yury Gerasimenko,Jonathan Hodes,Joel Burdick,Claudia Angeli,Yangsheng Chen,Christie Ferreira,Andrea Willhite,Enrico Rejc,Robert G Grossman,V Reggie Edgerton.The Lancet.2011(9781)

[2]Reversibly immortalized human olfactory ensheathing glia from an elderly donor maintain neuroregenerative capacity[J].FilipLim,M.JesúsMartín‐Bermejo,VegaGarcía‐Escudero,M.TeresaGallego‐Hernández,AnaGarcía‐Gómez,AlbertoRábano,JavierDíaz‐Nido,Jesúsávila,M.TeresaMoreno‐Flores.Glia.2010(5)

[3]Olfactory ensheathing cells represent an optimal substrate for hippocampal neurons:an in vitro study[J].Rosalia Pellitteri,Michela Spatuzza,Antonella Russo,Damiano Zaccheo,Stefania Stanzani.International Journal of Developmental Neuroscience.2009(5)

[4]Distinct cell tropism of canine distemper virus strains to adult olfactory ensheathing cells and Schwann cells in vitro[J].Virus Research.2009(1)

[5]Similar behaviour and primate-like properties of adult canine Schwann cells and olfactory ensheathing cells in long-term culture[J].Brain Research.2008

[6]Potential of olfactory ensheathing cells for cell-based therapy in spinal cord injury[J].Radtke,Christine,Sasaki,Masanori,Lankford,Karen L,Vogt,Peter M,Kocsis,Jeffery D.Journal of Rehabilitation Research and Development.2008(1)

[7]花保安.嗅鞘细胞及其相关细胞培养的基础性研究[D].安徽理工大学,2012.

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