背景及概述[1][2]
磷酸肌酸激酶简称CPK。主要分布在骨骼肌和心肌，在脑组织和平滑肌等亦含有少量。正常人血清内也仅含少量肌酸磷酸激酶。但在某些疾病时，血中可有大量肌酸磷酸激酶出现。例如，儿童心肌炎时明显升高。
又称肌酸激酶(creatine kinase)。CPK是一种器官特异性酶，主要存在于骨骼肌、心肌和脑组织。CPK主要催化肌肉中磷酸肌酸(CP)与二磷酸腺苷(ADP)合成肌酸(C)和三磷酸腺苷(ATP)的生化反应。正常猪血清CPK含量较低，但猪在应激状态下由于肌细胞受损，可导致血液中CPK含量和活性的升高。因此CPK常用作评定猪应激综合征的指标依据之一。CPK测定有多种方法，常用的方法有Antonik法，测定结果在30单位/ml以下为阴性，31单位/ml以上为阳性;此外，还有Siqma法，测定结果在100单位/ml以下为阴性，101～200单位/ml为阳性。
测定方法[3]
肌酸激酶(CK)主要存在于骨骼肌和心肌，在脑组织中也有存在。下列情 况可使CK活性增高：急性心肌梗塞后2～4小时开始增高，可高达正常上限的 10～12倍，2～4天恢复正常。测定CK对心肌梗塞的诊断优于AST、LD等；病毒性 心肌炎明显升高，对其诊断和预后有参考价值；脑血管意外、脑膜炎、甲状腺 功能低下患者；剧烈运动、各种插管和手术、肌肉注射冬眠灵和抗生素等。
现在普遍使用的测定血清中肌酸激酶的方法为比色法，该法是利用CK催化 磷酸肌酸(CrP)与二磷酸腺苷(ADP)反应生成三磷酸腺苷(ATP)与肌酸(Cr)， 己糖激酶(HK)催化葡萄糖与ATP反应，形成葡萄糖-6-磷酸，葡萄糖-6-磷酸 脱氢酶催化葡萄糖-6-磷酸氧化，形成6-磷酸葡萄糖内酯及NADPH，NADPH生成 的速率代表CK活力。
CN200610115000.1提供一种灵敏度高、线性范围宽、方便、安全的血清中肌酸激酶的化学发光测定方法。解决该技术问题采用的主要技术方案：血清中肌酸激酶的化学发光测定方法，其特征在于利用CK催化磷酸肌酸(CrP)与二磷酸腺苷(ADP)反应生成三磷酸腺苷(ATP)与肌酸(Cr)；再用甘油激酶(GK)催化三磷酸腺苷(ATP)及甘油生成3-磷酸甘油(G-3-P)；3-磷酸甘油(G-3-P)被磷酸甘油氧化酶(GPO)氧化，并产生过氧化氢；再经过氧化物酶作用，过氧化氢使化学发光物氧化而发光；光信号的大小与肌酸激酶的浓度呈正相关，即肌酸激酶浓度越大发出的光信号越强；记录这种光信号即可推测肌酸激酶的浓度；用已知浓度的肌酸激酶与测出的光信号，作出剂量-反应曲线；未知样品的肌酸激酶含量可从该曲线推算出来；所述的化学发光物为鲁米诺。
本发明与现有技术相比有如下优点：用化学发光物代替显色物，达到更灵敏、更稳定、范围宽、更安全的目的。用该方法可以制备相应的定量测定血清中肌酸激酶的商品试剂盒。
具体优点是：①灵敏 度更高。传统方法是检测颜色深浅，而化学发光是测光信号，可一个一个光子计数，所测的最低限更小，因而灵敏度更高。②线性范围宽。测颜色的深浅的分辨率比光子计数的精度要低得多，化学发光的检测范围高达105。③安全适用。化学发光物如鲁米诺等很安全，整个检测过程无有害物出现，无论是检测或处理废物都很安全，有利于环境保护。④便于普及。
本发明所制备的试剂盒，可用于全自动测量，也可用于手工或半自动测量，适宜大、中、小各层次的医疗和研究机构使用。⑤巨大的社会效益。用化学发光法测定生化指标或免疫物质，可同用一台化学发光仪，不再需要进口昂贵的生化仪，节省大量资金，不只降低了成本，对医疗机构、患者及社会均大有益处。
固定方法[2]
CN201210232877.4提出了一种肌酸激酶固定化的方法。它以壳聚糖为原料，先制备出交联壳聚糖溶液，再制备出交联壳聚糖微球，然后制备出接枝赖氨酸交联壳聚糖树脂，最后以接枝赖氨酸交联壳聚糖树脂为载体固定化肌酸激酶。本发明的优点可以使用常规的生产设备在温和的条件下生产磷酸肌酸，工艺简单，操作简便且易于控制，生产成本低，提高了生产效率，生产过程有利于保护环境；且制备的固定化肌酸激酶对热、酸、碱、有机溶剂等条件的稳定性都有显著增加。
主要参考资料
[1] 养猪词典
[2] 儿科学辞典
[3] CN200610115000.1 血清中肌酸激酶的化学发光测定方法
[4] CN201210232877.4一种肌酸激酶固定化的方法