背景[1-4]
小鼠神经小胶质细胞提取物是从小鼠原代神经小胶质细胞提取的，小鼠原代神经小胶质细胞从正常小鼠脑组织制备。小鼠神经小胶质细胞提取物可以直接用于基因克隆，表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。
神经胶质细胞，简称胶质细胞，是神经组织中除神经元以外的另一大类细胞，也有突起，但无树突和轴突之分，广泛分布于中枢和周围神经系统。在哺乳类动物中，神经胶质细胞与神经元的细胞数量比例约为10：1。在中枢神经系统(CNS)中的神经胶质细胞主要有星形胶质细胞、少突胶质细胞(与前者合称为大胶质细胞)和小胶质细胞等。
传统认为胶质细胞属于结缔组织，其作用仅是连接和支持各种神经成分，其实神经胶质还起着分配营养物质、参与修复和吞噬的作用，在形态、化学特征和胚胎起源上都不同于普通结缔组织。CD11b单克隆抗体(OX42)特异性标记小胶质细胞，因能识别鼠的CR3受体，CR3受体位于小胶质细胞的分支，故OX42抗体特异性标记小胶质细胞。
应用[5][6]
小鼠神经小胶质细胞提取物可用于甘草查尔酮A对LPS诱导的小胶质细胞活化的影响及其机制：
在正常的脑组织中,小胶质细胞呈现分枝状,为静息状态。分枝状的小胶质细胞具有维持神经系统微环境的动态平衡和修复其损伤的功能。活化的小胶质细胞呈现变形虫样,具有吞噬异物和分泌一些细胞因子和趋化因子的功能。过度活化的小胶质细胞释放的促炎细胞因子类(TNF-α、IL-6和IL-1β)和促炎酶类(i NOS和COX-2)能够导致神经元死亡,死亡的神经元又可以引发小胶质细胞活化。
炎症反应的恶性循环使脑部的神经元持续的变性与死亡,加剧着炎症的发生发展。越来越多的研究表明小胶质细胞活化引发的神经炎症反应在神经退行性疾病如帕金森病等疾病发生发展中发挥着重要作用。因此,抑制小胶质细胞过度激活引发的炎症能够阻止神经退行性疾病进一步发展。甘草查尔酮A(Licochalcone A)为甘草中黄酮类化合物,具有广泛的药理活性,包括抗炎、抗肿瘤、抗菌和抗寄生虫等。用MTT法确定甘草查尔酮A对BV-2细胞的浓度范围。不同浓度的甘草查尔酮A预处理BV-2细胞1h,LPS刺激4h,利用Western blot和荧光定量PCR检测各组的i NOS和COX-2表达量的变化,以确定甘草查尔酮A的浓度。
为了确定不同浓度甘草查尔酮A对LPS诱导的小胶质细胞产生的促炎细胞因子的影响,利用荧光定量PCR检测甘草查尔酮A预处理BV-2细胞1h,LPS刺激4h,各组的促炎细胞因子(TNF-α、IL-6和IL-1β)m RNA表达量的变化;利用ELISA检测甘草查尔酮A预处理BV-2细胞1h,LPS刺激24h,各组的促炎细胞因子(TNF-α、IL-6和IL-1β)分泌量的变化。然后用Western blot技术检测甘草查尔酮A对LPS诱导的小胶质细胞中MAPK信号通路和NF-κB信号通路的影响。
参考文献
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[4]Anti‐Inflammatory Effect of Ascochlorin in LPS‐Stimulated RAW 264.7 Macrophage Cells Is Accompanied With the Down‐Regulation of iNOS,COX‐2 and Proinflammatory Cytokines Through NF‐κB,ERK1/2,and p38 Signaling Pathway[J].Sook‐Hyun Lee,Choong‐Hwan Kwak,Sung‐Kyun Lee,Sun‐Hyung Ha,Junyoung Park,Tae‐Wook Chung,Ki‐Tae Ha,Suk‐Jong Suh,Young‐Chae Chang,Hyeun Wook Chang,Young‐Choon Lee,Bong‐Seok Kang,Junji Magae,Cheorl‐Ho Kim.J.Cell.Biochem..2016(4)
[5]Deletion of Herpud1 Enhances Heme Oxygenase-1 Expression in a Mouse Model of Parkinson’s Disease[J].Thuong Manh Le,Koji Hashida,Hieu Minh Ta,Mika Takarada-Iemata,Koichi Kokame,Yasuko Kitao,Osamu Hori,Antonio Pisani.Parkinson’s Disease.2016
[6]黄炳旭.甘草查尔酮A对LPS诱导的小胶质细胞活化的影响及其机制[D].吉林大学,2016.