BxPC-3（人原位胰腺腺癌细胞）

BxPC-3 人原位胰腺腺癌细胞是从一名 61 岁女性腺癌患者的胰腺组织中分离出来的细胞系，可用于癌症研究。该来源胰体癌无转移，分泌CEA、CA199黏蛋白，属于KRAS野生型胰腺癌。BxPC-3细胞不表达囊肿性纤维化跨膜电导调节子(CFTR)，CFTR阳性的细胞株是Capan-1。

BxPC-3细胞不表达囊肿性纤维化跨膜电导调节子（CFTR），CFTR阳性的细胞株是Capan-1。

人

胰腺贴壁生长

上皮细胞样

完全培养基：90% RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S
气相：95% 空气+5% CO2
温度：37℃

胰腺癌细胞

弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.02%EDTA）于培养瓶中，使消化液浸润所有细胞，将培养瓶置于37℃培养箱中消化1 -3min（视细胞消化情况而定），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加2-3ml完全培养基终止消化。轻轻打匀后装入无菌离心管中，1000 rpm离心5 min，弃去上清液，补加1-2 mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中，置于培养箱中培养。

冻存液配制：90% 完全培养基 + 10% DMSO
冻存步骤：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。收集细胞及细胞培养液，装入无菌离心管中，1000 rpm条件下离心4 min，弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS，进行细胞计数。根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度5x10⁶~ 1x10⁷/mL，轻轻混匀，每支冻存管冻存1mL细胞悬液，注意冻存管做好标识。将冻存管放入梯度冻存盒，24 h后转入液氮灌储存。若无梯度冻存盒也可先放入4℃冰箱2h，接着放入-20℃冰箱4h，再置于-80℃冰箱过夜后转入液氮灌储存。

BxPC-3 人原位胰腺腺癌细胞 STR鉴定位点如下：
D3S1358：14,16
TH01：9
D21S11：29
D18S51：12
Penta_E：12,14
D5S818：11
D13S317：11
D7S820：10,13
D16S539：9,11
CSF1PO：13
Penta_D：14
vWA：14,18
D8S1179：13
TPOX：8
FGA：20,21
D19S433：13,16.2
D2S1338：17,19
Amelogenin：X

该细胞系是合适的转染宿主。女性胰腺；腺癌人原位胰腺腺癌细胞可以从冷冻存储的细胞库中解冻。将冻存管放在37℃的水浴中，快速将管子中的细胞解冻。添加预先配置好的培养基到细胞中，轻轻混合细胞和培养基，将混合物转移至预先消毒的离心管中。将细胞离心10分钟，去除上清液，再次加入预先配置好的培养基，将细胞转移至预先消毒的培养皿中。61 岁（61 years）将培养皿放置在37℃的恒温培养箱中，保持5%的CO2气氛和适当的湿度。每隔1-2天更换一次新的培养基，以促进细胞的生长和增殖。注意不要在细胞培养期间将细胞暴露在空气中，以防人原位胰腺腺癌细胞受到氧化损伤。肿瘤细胞腺癌（Adenocarcinoma）