T5核酸外切酶
T5核酸外切酶 性质
T5核酸外切酶沿5’→3’方向降解DNA，它可降解双链DNA、单链DNA和缺刻的质粒DNA。它既能从5’-末端起始降解DNA，也能从线性或环状双链DNA的切刻或缺口处起始降解DNA，但不能降解超螺旋双链DNA。T5核酸外切酶可应用于Gibson组装。（1）1× T5 Exo Buffer：50mM KAc，20mM Tris-Ac pH 7.9，10mM Mg(Ac)2，1mM DTT。该酶在PCR Buffer中也具有活性。 （2）该酶的最佳反应温度为37°C，在50°C也具有一定活性，因此可用于Gibson组装。T5核酸外切酶纯化自含T5噬菌体D15基因质粒的E.coli菌株，是核酸外切酶的一种，该酶能沿5′→3′方向降解DNA。它既能从5′末端起始消化，也能从线性或环状双链DNA的切刻或缺口处起始消化，但不能降解超螺旋双链DNA。T5核酸外切酶还具有单链DNA核酸内切酶活性。这些特性使得T5核酸外切酶常被用于消化DNA和基因克隆上。