大鼠垂体瘤细胞

大鼠垂体瘤细胞是由Tashjian·A·H等人于1965年7月从一只7月龄的雌性Wistar-Furth大鼠的垂体肿瘤中分离建立的。GH3细胞不是直接来源于GH1细胞的克隆，而是从原代培养的GH1细胞在大鼠身上传代两次形成的肿瘤中建立的。上皮细胞样的GH3细胞比GH1细胞分泌更高水平的生长激素，也可产生催乳素。对调控GH3细胞分泌蛋白类激素的研究表明，氢化可的松可以刺激GH3细胞生长激素的分泌、抑制催乳素的产生。大鼠垂体瘤细胞源自大鼠垂体瘤，分泌泌乳素；表达功能性多巴胺受体。该细胞在免疫抑制的小鼠中不能成瘤，但在半固体培养基中可形成克隆。

一．培养基及培养冻存条件准备：

1）准备F12K培养基；优质胎牛血清，2.5%；HS，15%；双抗，1%。

2）培养条件：气相：空气，95%；二氧化碳，5%。温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。

二．细胞处理：

1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入250px皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。