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DNA PULLDOWN试剂盒

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产品介绍: 中文名称:DNA PULLDOWN试剂盒
英文名称:DNA pulldown Kit
DNA PULLDOWN试剂盒专题
DNA pulldown试剂盒
DNA pulldown试剂盒利用预先使用BSA、寡核苷酸随机引物封闭磁珠,降低了磁珠与蛋白、基因组DNA的非特异性结合。DNA pulldown技术是一种用于研究DNA与蛋白质互作的技术,通常用来分析目标基因调控区域相结合的转录因子及其他调控蛋白。针
2020/10/29 13:44:49
DNA PULLDOWN试剂盒
背景操作方法用途 专题
中文名称:DNA PULLDOWN试剂盒
中文同义词:DNA PULLDOWN试剂盒
英文名称:DNA pulldown Kit
英文同义词:DNA pulldown Kit
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相关类别:表观遗传;表观遗传试剂盒
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DNA PULLDOWN试剂盒
DNA PULLDOWN试剂盒 性质
DNA PULLDOWN试剂盒 用途与合成方法
背景现有研究DNA-蛋白相互作用的技术方案有多种,如酵母单杂交(Y1H)方法、ChIP-seq方法、凝胶迁移实验(EMSA)和DNA pulldown方法。DNA pulldown方法是一种非常重要的蛋白质-DNA相互作用的研究方法。该方法可以在同一个样品中分离DNA-蛋白复合体。通常,是通过高亲和性的标签(如生物素)标记DNA,标签的目的是固定DNA,通过琼脂糖珠子或磁珠可以分离出生物素化的DNA,从而分离出细胞裂解液中的DNA-蛋白复合体。分离出的蛋白进行洗脱后可以通过Western Blot进行检测,或通过质谱进行筛选
操作方法S1、磁珠预处理:使用BSA(牛血清白蛋白)和寡核苷酸随机引物封闭链霉亲和素标记的磁珠;S2、制备探针‑磁珠复合物;S3、提取并预处理细胞核蛋白:向提取核蛋白样品中加入脱氧核糖核酸酶孵育,再加入磁珠孵育,去除磁珠,收集上清;S4、pulldown;S5、蛋白样品的收集。
用途DNA pulldown是一种用于研究DNA与蛋白质互作的技术。通常用来分析目标基因调控区域相结合的转录因子及其他调控蛋白。针对目标区域设计脱硫生物素标记的特异性DNA探针,并与细胞核提取物孵育。通过偶联磁珠,经洗脱,得到目的DNA探针-蛋白质复合物。最后采用Western Blot或质谱鉴定蛋白质类型。
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