凝血酶原（FII）是一种依赖维生素K的单链糖蛋白，分子量为72 kDa，当存在FXa、FVa、钙离子和磷脂的情况下，由FXa激活为凝血酶（FIIa）。
凝血酶原(FII)活性检测的显色试剂盒用于定量测定血浆和含有凝血酶原（FII）的浓缩物中凝血酶原（FII）的功能活性。该方法适用于柠檬酸盐或EDTA采集的血浆。
艾美捷Rossix凝血酶原(FII)活性检测的显色试剂盒（Ros-200040）测量原理：
FII的功能活性通过一种显色凝血酶原酶方法进行测定，其中人源FII在牛FV、钙离子和磷脂的存在下，由人源FXa激活为凝血酶（FIIa）。通过对显色凝血酶原酶底物的水解来确定形成的FIIa的量。样品的FII活性与血浆或FII浓缩物标准进行比较，FII的效力以国际单位（IU）表示。凝血酶原酶复合物对γ-羧化敏感，因此与蛇毒基于凝血酶原的方法不同，该方法不会激活α-羧基化的FII。
凝血酶原(FII)活性检测的显色试剂盒成分：
活化剂试剂，3.0 mL（4支）- REF 2010
活化剂试剂含有冻干的人源FXa、牛FVa、CaCl2和磷脂。每支试剂足够进行25次测试。
FIIa底物，6 mL（1支）- REF 2080
显色凝血酶（FIIa）底物（H-D-Phe-Pip-Arg- pNA）的液体溶液，浓度为2.0 mmol/L。
FII稀释缓冲液，储备溶液，20 mL（1支）- REF 2050
稀释缓冲液的液体储备溶液。
准备工作：
活化剂试剂
用3.0 mL水重溶。在20-25°C下静置5分钟，并进行间歇性轻轻混匀，完全重溶。
FIIa底物，6 mL
可直接使用。
FII稀释缓冲液，储备溶液，20 mL
用水稀释1 + 9，得到0.05 mol/L Tris-HCl缓冲工作溶液，pH值为7.3（20°C），含有1%牛血清白蛋白。
注意：所有重溶和稀释应使用至少符合NCCLS II型水3或欧洲药典注射用水的质量的水进行。
存储和稳定性：
密封的试剂在2-8°C下稳定，直到标签上的失效日期。注意避免试剂受微生物污染。
- 重溶后的活化剂试剂：
重溶后在2-8°C下稳定8小时，在20-25°C下稳定2小时，在37°C下稳定2小时。
- 显色凝血酶（FIIa）底物：
打开的瓶子在2-8°C下稳定1个月。
- FII稀释缓冲液储备溶液：
打开的瓶子在2-8°C下稳定1个月。
缓冲工作溶液应在制备当天使用。
所需但未提供的材料：
- 去离子水，NCCLS II型水或欧洲药典注射用水或更高质量的水。
- 人血浆或FII浓缩物，效力与世界卫生组织（WHO）FII活性国际标准相比。
- 柠檬酸，2%（用于终点法）
- 校准的移液管
- 光度计，405 nm（终点法还需490 nm）
- 37°C恒温培养箱
- 塑料试管和涡旋混匀器
- 计时器
注意：
制备活化剂试剂时使用的每个供体单位均经过FDA批准的方法进行了乙型肝炎表面抗原和HIV 1和2以及丙型肝炎抗体的检测，结果为阴性。然而，由于没有任何测试可以完全排除这些血液传播疾病的存在，因此在处理和处置这种人源试剂时应谨慎。
- 避免与皮肤和眼睛接触。
- 不要排入下水道。
- 穿适当的防护服。
艾美捷科技是Rossix的中国代理商，为科研工作者提供优质的产品与服务。
https://www.amyjet.com/products/Ros-200040.shtml