总超氧化物歧化酶(SOD)检测试剂盒 (NBT 核黄素比色法)
一、产品简介： 超氧化物岐化酶(Superoxide Dismutase, SOD)是含金属辅基的酶，能催化超氧化物阴离子 发生岐化作用，生成过氧化氢(H2O2)和氧气(O2)，是生物体内一种重要的抗氧化酶；由于超氧自 由基是不稳定的的自由基，寿命极短，SOD 活性一般用间接方法测定，并利用各种呈色反应来测 定 SOD 活力，其中显色剂有 NBT(四氮唑蓝)、WST-1、WST-8 等。 雅吉生物总超氧化物歧化酶(SOD)检测试剂盒(NBT 核黄素微板法)(Total Superoxide Dismutase Assay Kit with NBT)是一种基于 NBT 的显色反应，通过比色来检测组织、细胞、植 物、血清或其它样品中 SOD 即超氧化物歧化酶活性的试剂盒，其检测原理是利用 SOD 抑制 NBT 在光照下的还原作用来确定酶活性大小。在有氧化合物存在的情况下，核黄素被光还原，后经一 系列的反应可将 NBT 还原为蓝色的甲臜(formazan)，后者在 560nm 处有强吸收，SOD 可清除超氧 阴离子(O2.-)，从而抑制了甲臜的形成，反应液蓝色愈深说明超氧化物岐化酶活性愈低，反之则 酶活性愈高，据此通过比色分析就可以计算出超氧化物岐化酶活性水平。 该试剂盒仅用于科研领域，不适用于临床诊断或其他用途。
二、产品组成： 名称 50T 100T Storage 试剂(A): SOD 提取液 250ml 2×250ml RT 试剂(B): NBT 显色液 15ml 30ml -20℃ 避光 试剂(C): 酶溶液 15ml 30ml -20℃ 避光 试剂(D): 反应启动液 10ml 20ml 4℃
三、自备材料： 1、生理盐水或 PBS 2、离心机、离心管、小试管 3、分光光度计、比色杯 4、水浴锅或恒温箱
四、操作步骤(仅供参考)： 1、准备样品： ①血浆或含红细胞的样品：从待测样品中分理出的血清或血浆不应有溶血，如果含有应 去除红细胞后检测，如超过检测范围，用 SOD 提取液稀释后检测。血清去除红细胞的简 易方法如下：用抗凝管收集血液，颠倒混匀，取至少 500μl 全血，4℃ 3000g 离心 5min， 转移上清至另一新的 1ml 离心管中，适量生理盐水稀释后待测；亦可采用红细胞裂解液 去除红细胞，如 ACK 红细胞裂解液等