碘化丙啶染色
发布日期:2014/7/4 9:02:59发布人：上海源叶生物科技有限公司
1．原理 碘化丙啶(propidium iodide，PI)不能穿人完整的活细胞膜中，即正常细胞和凋亡细胞在不固定的情况下对PI拒染，而坏死细胞 由于失去膜的完整性，PI可进入细胞内与DNA结合，根据此特点，使用PI染色可鉴别死细胞。如果对活细胞染色必须在染色前进行固定，以增加细胞膜对染料的通透性。
2．溶液配制 使用0．01mol／LPBS(pH 7．4)配制终浓度为0．5mg／ml的PI工作液。
3．染色程序
(1)单层细胞培养标本经预冷70％乙醇固定1小时，4℃；
(2)0．01mol／LPBS(pH 7．4)冲洗；
(3)沥干后加入PI工作液，室温孵育15分钟；
(4)冲洗后封片。
结果：PI激发波长和发射波长分别为488nm和630nm，荧光显微镜观察，DNA呈红色荧光。
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