细菌生长的最高、最适和最低温度，常常是某些细菌鉴定的特征之一。测定细菌的生长温度，要求培养液十分清晰（如普通肉汤培养液），并采用液体菌种直针接种（不用接种环接种）。放置于恒温水浴培养。指示温度计应放在同样的试管和培养基内，在指定温度下培养2－5d，观察生长情况。在接近0℃的低温培养，则观察时间可延长至7－10d，甚至30d。
观察记录结果：
目测生长情况，与未接种的空白培养基对比，注意混浊度、沉淀物和悬浮物等项，并分级记录如下：
（1）“＋“：表示生长良好；与对照管相比，可清楚地判定是混浊的。
（2）“＋－“：表示生长差；与对照管相比，只有在某一观察角度时方能看到明显的混浊。
（3）“－“：表示不生长；在适宜的角度下观察，与对照无差异。
总之，培养5d，能生长者均按生长计，否则按不生长计，凡培养5d仍属可疑者或不生长者必须重测，在重测时，可能出现有时生长，有时不生长的不稳定现象，这可能有两种原因：一种是水浴温度不稳定，培养时温度波动大；另一种原因可能是所测定的温度，恰好是测定菌的临界生长温度，在这种情况下，可用提高一度或降低一度的办法肯定之。
必须注意，当测定的试管较多时，不可将试管捆成一捆浸于水浴中，这样捆着的试管内外温度不一致，易出现误差。用特制试管架放试管，所用温度计应用标准温度计标定过。