"526-mel细胞:人黑色素瘤细胞系
细胞背景资料:黑色素瘤
细胞形态:上皮细胞样
细胞生长:贴壁
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
细胞生长特性:贴壁
细胞培养无菌操作的演示:凡是带入超净工作台内的酒精、PBS、培养基、胰蛋白酶的瓶子均要用75%酒精擦拭瓶子的外表面;靠近酒精灯火焰操作。器皿使用前必须过火灭菌,继续使用的器皿(如瓶盖、滴管)要放在高处,使用时仍要过火。各种操作要靠近酒精灯,动作要轻、准确,不能乱碰。如吸管不能碰到废液缸。吸取两种以上的使用液时要注意更换吸管,防止交叉污染。玻璃器械洗消:一、新的玻璃器皿的洗消:自来水刷洗,除去灰尘。烘干、泡:烤箱中烘干,然后再浸入5%稀中12小时以除去脏物、铅、等物。刷洗、烘干:12小时后立即用自来水冲洗,再用洗涤剂刷洗,自来水冲干净后用烤箱烘干;泡酸、清洗:用清洁液浸泡12小时,然后从酸缸内捞出器皿用自来水冲洗15次,最后蒸馏水冲洗3-5次和用双蒸水过3次。烘干、包装:洗干净后先烘干,然后用牛皮纸(油光纸)包装。高压消毒:包装好的器皿装入高压锅内盖好盖子,打开开关和安全阀,当蒸气成直线上升时,关闭安全阀,当指针指向15磅时,维持20-30分钟。高压消毒后烘干。二、旧的玻璃器皿的洗消:刷洗、烘干:使用过的玻璃器皿可直接泡入来苏尔液或洗涤剂溶液中,泡过来苏尔溶液(洗涤剂)的器皿要用清水刷洗干净,然后烘干。泡酸、清洗:烘干后泡入清洁液(酸液),12小时后从酸缸内捞出器皿立即用自来水冲洗(避免蛋白质干涸后粘附于玻璃上难以清洗),再用蒸馏水冲洗3次。烘干、包装:洗干净的器皿烘干后取出用牛皮纸(油光纸)等包装。
公司细胞库冻存并保种有2300多种各类细胞系。针对每种不同的细胞系,公司摸索并积累了大量细胞培养条件和优化参数,为您的细胞实验保驾护航。细胞培养是生命科学研究中最基础、也是最常用的实验手段。从冻存→复苏→传代→实验,在每一次细胞培养的过程中我们都是精心呵护,小心培养,心里都是默默承诺:我要护你一世周全!可是可是……无数次细胞都因污染而离我而去,投入的不只是我们貌美如花的青春,还有那一去不复返的经费!在细胞生物学,生物化学,免疫学,神经生物学,病理学……只要涉及细胞的研究领域,都面临着支原体污染的威胁。在众多污染物中,也就属支原体最狡猾了,他最善于隐藏自己,因为被支原体污染的细胞不会马上死亡,但会改变细胞的新陈代谢,甚至会改变细胞的基因表达谱,我们就这样被欺骗了无数次,谁让我们就是个看“颜值”的花痴了。可是我们通过被虐了几百次的经验中总结出来,当你的细胞出现了这些症状时:生长速率改变;活性减弱;形态改变;染色体畸变;转染效率显著降低;细胞复苏后存活率降低……。那你就得千万小心了,也许你的细胞已经被支原体欺凌了!
细胞培养相关问题总结:冷冻管应如何解冻?取出冷冻管后,须立即放入37°C水槽中快速解冻,轻摇冷冻管使其在1分钟内全部融化,并注意水面不可超过冷冻管盖沿,否则易发生污染情形。另冷冻管由液氮桶中取出解冻时,必须注意安全,预防冷冻管之爆裂;细胞冷冻管解冻培养时,是否应马上去除DMSO?除少数特别注明对DMSO敏感之细胞外,绝大部分细胞株(包括悬浮性细胞),在解冻之后,应直接放入含有10-15ml新鲜培养基之培养角瓶中,待隔天再置换新鲜培养基以去除DMSO 即可,如此可避免大部分解冻后细胞无法生长或贴附之问题;可否使用与原先培养条件不同之培养基?不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基,若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基,细胞大都无法立即适应,造成细胞无法存活;可否使用与原先培养条件不同之血清种类?不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源,所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清,在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同,血清使用错误常会造成细胞无法存活;培养细胞时应使用5%或10%CO2?或根本没有影响?一般培养基中大都使用HCO3-/CO32-/H+作为pH的缓冲系统,而培养基中NaHCO3的含量将决定细胞培养时应使用的CO2浓度。当培养基中NaHCO3含量为每公升3.7g时,细胞培养时应使用10%CO2;当培养基中NaHCO3为每公升1.5g时,则应使用5%CO2培养细胞。何时须更换培养基?视细胞生长密度而定,或遵照细胞株基本数据上之更换时间,按时更换培养基即可。培养基中是否须添加抗生素?除于特殊筛选系统中外,一般正常培养状态下,培养基中不应添加任何抗生素。
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