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✅产品推荐-钙离子螯合剂BAPTA系列

发布日期:2025/11/7 9:18:19发布人:怀化市冰峰化工有限公司
        BAPTA(1,2 - 双 (2 - 氨基苯氧基) 乙烷 - N,N,N',N'- 四乙酸)及其四钠盐、四钾盐是常用的钙离子螯合剂,在化学和生物学实验中用于精确调控钙离子浓度。以下从结构、理化性质、应用场景及使用注意事项等方面进行对比分析:

一、化学结构与基本性质

  1. BAPTA(游离酸)
    • 结构:含有四个羧酸基团(-COOH),呈弱酸性,水溶性较低(需有机溶剂溶解)。

    • 特点:作为母体化合物,通常需转化为盐形式以增强水溶性,常用于合成衍生物(如 BAPTA-AM)。

  2. BAPTA 四钠盐
    • 结构:四个羧酸基团与钠离子(Na⁺)结合,形成稳定的钠盐结构。

    • 水溶性:高(10 mg/mL,澄清淡黄溶液),易溶于水和缓冲液,适合直接用于水溶液实验。

    • 分子量:约 620.5(具体因结晶水而异)。

    • 稳定性:在生理 pH 范围内(6.0-8.0)稳定,不易受 pH 波动影响。

  3. BAPTA 四钾盐
    • 结构:四个羧酸基团与钾离子(K⁺)结合,形成钾盐结构。

    • 水溶性:极高(100 mg/mL),远高于钠盐,适用于需高浓度螯合剂的场景。

    • 分子量:约 632.8。

    • 稳定性:同样在生理 pH 下稳定,但对镁离子(Mg²⁺)的选择性略低于钠盐(选择性比约 100:1)。

二、钙离子结合特性

  • 结合常数(Kd):两者对钙离子的亲和力均极高(Kd ≈ 10⁻⁹ M),适用于低浓度钙信号监测。例如,BAPTA 四钠盐在无镁条件下 Kd 为 110 nM,四钾盐在无镁条件下 Kd 为 160 nM,在 1 mM Mg²⁺存在时升至 440 nM。

  • 选择性:对 Ca²⁺的选择性远高于 Mg²⁺(钠盐选择性 > 100 倍,钾盐选择性约 105 倍),且受 pH 影响小,优于传统螯合剂(如 EDTA、EGTA)。

  • 结合速率:因分子结构中含芳香氮原子,结合 Ca²⁺的速率常数(kₒₙ)比 EDTA 高 10⁴倍,适合捕获瞬态钙信号(如细胞内钙瞬变)。

三、应用场景对比

1. BAPTA 四钠盐

  • 优势:
    • 荧光检测:与 Ca²⁺结合后,紫外吸收峰从 254 nm 红移至 279 nm(pH > 6.0),可通过分光光度法或荧光显微镜实时监测钙浓度变化。

    • 胞内钙调控:虽本身无膜通透性,但可通过酯化修饰(如 BAPTA-AM)进入细胞,用于研究胞内钙信号通路。

    • 稳定性:在生理条件下长期稳定,适合长时间实验(如细胞培养、组织切片)。

  • 典型应用:
    • 动态钙信号监测(如神经元、肌肉细胞)。

    • 药物筛选中评估钙依赖的细胞反应。

    • 神经保护研究(如抗癫痫、抗兴奋性毒性损伤)。

2. BAPTA 四钾盐

  • 优势:
    • 高水溶性:100 mg/mL 的溶解度使其可快速配制高浓度溶液,适用于需快速调整钙浓度的实验(如电生理学)。

    • 胞外钙调节:无膜通透性,仅作用于细胞外环境,避免干扰胞内钙稳态。

    • 低背景干扰:钾离子对细胞内环境的影响通常小于钠离子,尤其在需严格控制离子强度的实验中更具优势。

  • 典型应用:
    • 细胞外钙缓冲液的配制(如膜片钳实验)。

    • 研究钙依赖的酶活性(如胞外酶促反应)。

    • 急性组织处理(如脑片钙成像)。

四、使用注意事项

  1. 储存条件:
    • 钠盐和钾盐均需干燥避光保存(-20℃),避免吸潮。钠盐溶液需分装后冻存,避免反复冻融。

    • 钾盐因水溶性极高,需注意溶解后尽快使用,避免长时间放置导致离子浓度变化。

  2. 溶液配制:
    • 钠盐:建议用去离子水或缓冲液溶解至 10 mg/mL,现配现用或分装冻存。DMSO 溶液(20 mg/mL)可用于需有机溶剂的场景。

    • 钾盐:直接溶于无钙缓冲液,推荐浓度 10 μM,避免与含镁溶液混合(镁离子会降低钙结合能力)。

  3. 离子干扰:
    • 两者对镁离子的选择性有限,高浓度镁离子(>1 mM)会显著降低钙结合效率。实验中需根据需求调整镁离子浓度或选择其他螯合剂(如 5,5’- 二甲基 BAPTA)。

  4. 荧光特性:
    • 钠盐与钙结合后具有荧光活性,可通过荧光染料(如 Fura-2)进行可视化检测;钾盐未明确提及荧光特性,可能更适合非荧光检测方法(如比色法)。

五、价格与性价比

  • BAPTA 四钠盐:价格较高(如 1g 约 720 元),但因水溶性适中、应用广泛,综合性价比高。

  • BAPTA 四钾盐:价格显著低于钠盐(如 100mg 约 70 元),尤其适合需高浓度螯合剂或大规模实验。

总结

  • BAPTA 四钠盐:平衡了水溶性、荧光检测能力及钙结合特异性,是细胞内钙信号研究的首选。

  • BAPTA 四钾盐:凭借超高水溶性和低离子干扰特性,在胞外钙调控及需高浓度螯合剂的实验中更具优势。

  • BAPTA(游离酸):主要作为合成前体,用于制备膜通透性衍生物(如 BAPTA-AM)或特定盐形式。

实验中应根据具体需求(如钙浓度范围、检测方法、离子环境)选择合适的盐形式,并严格控制储存和使用条件以确保实验准确性。


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