1. TMB（四甲基联苯胺）CAS:54827-17-7
TMB是当前应用最广泛的HRP底物之一，以其高安全性和良好灵敏度成为ELISA实验的首选。
反应特性：在HRP催化下，TMB产生蓝色可溶性产物，加入酸性终止液后变为黄色，在450nm波长下有最大吸收峰。
优势特点：与传统的联苯胺相比，TMB无致癌性，使用更为安全；显色灵敏度高，检测下限可达皮克级别。
主要应用：酶联免疫吸附试验、临床诊断试剂盒、潜血指纹检测。
2. DAB（3,3-二氨基联苯胺）CAS:91-95-2
DAB是免疫组化实验中不可或缺的“老将”，以其卓越的定位能力而备受青睐。
反应特性：HRP催化DAB氧化后形成不溶性的棕色沉淀，该沉淀性质稳定，不易褪色。
独特优势：产生的沉淀定位精确，不扩散，特别适合于组织切片中抗原的精确位；与重金属增强剂联用可进一步提高灵敏度。
安全警示：DAB具有潜在致癌性，操作时需在通风橱内进行，并佩戴防护装备，废弃物需专门处理。
主要应用：免疫组织化学、免疫印迹。
3. ABTS （CAS:30931-67-0）
ABTS是一种安全、稳定的HRP底物，在特定实验场景中表现出独特优势。
反应特性：与HRP反应后生成稳定的绿色可溶性产物，在405nm、414nm和428nm处有特征吸收峰。
性能特点：显色反应线性范围宽，适于宽浓度范围的检测；配伍性强，不易与其他试剂发生干扰。
主要应用：ELISA检测、抗氧化能力评估。
4. BCIP （CAS:6578-06-9）
5. NBT （CAS:298-83-9）
BCIP和NBT是一对“黄金搭档”，共同构成了碱性磷酸酶最常用的底物组合。
反应机制：在碱性磷酸酶催化下，BCIP被水解产生强还原剂，进而将淡黄色的NBT还原为不溶性的深蓝色甲臜沉淀。
系统优势：信噪比高，背景染色浅；显色对比度极佳，特别适合于膜检测和细胞染色。
注意事项：两者需配合使用，单独使用无法完成显色反应。
主要应用：Western Blot、免疫组化、 Northern Blot。
6. PNPP （CAS:333338-18-4）
PNPP是磷酸酶活性检测的经典选择，以其操作简便、结果稳定而广受欢迎。
反应特性：在碱性磷酸酶作用下水解生成对硝基苯酚，在碱性条件下呈黄色，在405nm处有最大吸收。
优势特点：水溶性好，配制简便；反应线性关系良好，适于酶动力学研究；性价比高，适合大规模筛查。
主要应用：碱性磷酸酶活性测定、ELISA检测。
7. X-Gal （CAS:7240-90-6）
X-Gal是分子生物学实验室的“标志性”底物，让基因重组筛选变得直观简单。
反应机制：在β-半乳糖苷酶催化下，X-Gal水解产生不溶性蓝色沉淀，使菌落呈现蓝色。
核心应用：蓝白斑筛选是X-Gal最经典的应用，通过颜色变化快速识别含有重组质粒的菌落。
使用要点：需与诱导剂IPTG（汇百益自产原料）配合使用，且不应在培养基中高压灭菌。
主要应用：分子克隆、重组菌筛选。
8. X-Gluc（X-Glu）CAS:129541-41-9
X-Gluc是植物分子生物学研究的专用工具，专门用于GUS报告基因系统的检测。
反应特性：在β-葡糖苷酸酶作用下水解产生不溶性蓝色沉淀，可在植物组织原位显示GUS基因的表达位点。
独特价值：能够直观展示基因表达的时空特异性，是研究植物基因功能的利器。
主要应用：植物转基因分析、基因表达模式研究。
显色底物的作用机制主要建立在两大基础之上：
酶促显色反应
这是最常见的显色机制。特定的酶能够专一性地催化底物发生化学反应，改变其分子结构，从而产生颜色变化。
过氧化物酶系统：以HRP为代表，通过催化过氧化氢还原，同时氧化底物分子产生颜色变化。TMB、DAB和ABTS均属于此系统。
磷酸酶系统：以碱性磷酸酶为代表，通过水解底物分子的磷酸基团，产生有色的产物。BCIP/NBT和PNPP属于此系统。
糖苷酶系统：包括β-半乳糖苷酶和β-葡糖苷酸酶，通过水解糖苷键释放发色团。X-Gal和X-Gluc属于此系统。
物理吸附与荧光发射
除了化学显色反应外，一些底物通过物理吸附或荧光发射产生信号：
沉淀定位：如DAB氧化产物在反应原位形成不溶性沉淀，实现精确定位。
荧光产生：某些荧光底物在酶作用前无荧光，酶切后产生强烈荧光，灵敏度极高。
四、如何选择合适的显色底物
面对多样的显色底物，合理选择至关重要。以下几个方面值得考虑：
根据标记酶选择
HRP标记系统：可选TMB、DAB、ABTS。HRP分子量小、比活性高、成本较低，但对抑制剂敏感，不耐有机溶剂。
AP标记系统：可选BCIP/NBT、PNPP。AP稳定性好，不受HRP抑制剂影响，但分子量大、成本较高。
根据检测需求选择
高灵敏度需求：化学发光底物 > 荧光底物 > 沉淀型生色底物 > 可溶性生色底物。
定量分析需求：首选可溶性底物，如TMB、PNPP，便于光谱测定。
定位分析需求：首选沉淀型底物，如DAB、BCIP/NBT，可实现精确定位。
操作便捷性需求：即用型底物 > 配制型底物；单组分底物 > 多组分底物。
根据安全考量选择
对于常规实验教学或大规模筛查，应优先考虑安全性高的底物，如TMB、PNPP等。而对于需要高分辨定位的研究性实验，在做好防护的前提下可选择DAB等高风险高回报的底物。
五、显色底物的应用场景
在显色底物领域，湖南汇百益新材料有限公司凭借其专业技术积累，展现出独特的竞争优势：
技术专长领域
湖南汇百益在糖化合物研发与生产方面具有深厚积累，这正好是X-Gal、X-Gluc等糖苷类显色底物的核心技术领域。公司对糖化学的深入理解为生产高质量显色底物奠定了基础。
研发与质控能力
公司拥有专业的研发团队和完善的质量管理体系，通过ISO9001：2015质量体系认证，确保产品批次间的一致性和稳定性。这对于需要精确量化结果的显色底物至关重要。
产品系列完整性
基于在生物化学试剂领域的专业积累，湖南汇百益能够提供从基础生化试剂到专用显色底物的多种产品，满足不同用户的多样化需求。
客户导向的服务理念
公司注重技术支持与客户服务，能够为用户提供专业的产品选择和实验优化建议，帮助研究人员获得可靠的实验结果。
随着检测技术的不断发展，显色底物也在向着更高灵敏度、更好安全性、更强特异性的方向演进。无论是传统的生色底物，还是新兴的荧光探针，它们都将继续为科学研究提供强有力的技术支持，帮助人类更深入、更精确地探索生命奥秘。