mIHC在探究T细胞不同亚型表征和功能领域的应用分享：
T细胞是癌症免疫治疗的关键元素，但某些基本特性，如T细胞在肿瘤内的发育和迁移，仍然是难以捉摸的。TCR是识别外来和自身抗原所必需的，它可以作为谱系标签来追踪肿瘤中的T细胞。文章中，作者获得了12例结直肠癌（CRC）患者11138个单个T细胞的转录体，并建立了STARTRAC（通过RNA序列和TCR追踪进行单T细胞分析）指数，以定量分析20个功能和克隆性不同的T细胞亚群之间的动态关系。
文献中作者使用单细胞测序以及流式手段来建立STARTRAC指数，并使用多重荧光免疫组化技术进行定位观察，原位分析。
用CD3、CD4、CD8和FOXP3进行多色IHC染色，以验证大肠癌肿瘤中存在T细胞
经多色IHC染色的大肠癌的代表性例子显示抗Ki-67、CD8、PD-1和TIM-3在CD8+TEX细胞中共表达
多色IHC染色大肠癌的典型例子，白色箭头显示CD3、FOXP3和RORγ的共表达。
多重荧光免疫组化文献解读——总结
STARTRAC指数分析揭示了大肠癌不同T细胞亚群之间的各种功能、迁移和发育联系。作者的数据和先前在小鼠模型中的发现揭示了肿瘤浸润CD8+TEM细胞对TEMRA和TEX的TCR依赖性轨迹，提示了促进TEX向TEMRA转化的治疗策略。
在MSI患者中CXCL13+BHLHE40+IFNG+TH1样细胞的富集不仅为这些患者对检查点阻断的高反应率提供了理论依据，而且也引发了对这些细胞治疗的思考。差异表达基因的简编数据集，如IGFLR1，可通过交互式门户网站http://crc.cancer-pku.cn，可作为进一步探索T细胞的资源，以及识别新的调节机制和治疗靶点。
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