研究背景
脓毒症是一种由感染引发的致命性全身炎症反应，每年导致超过1400万人死亡。2025年，海军军医大学研究团队在《Cell Communication and Signaling》期刊发表的研究（DOI：10.1186/s12964-025-02278-w）发现，RNA聚合酶II亚单位5介导蛋白（RMP）是巨噬细胞先天免疫的关键调控因子。研究显示，RMP通过结合IκB激酶β（IKKβ）并招募蛋白磷酸酶2A（PP2A），抑制Toll样受体4（TLR4）诱导的NF-κB信号通路，从而控制脓毒症期间的过度炎症。这一机制为减轻脓毒症相关损伤提供了潜在的治疗靶点。
客户需求
海军军医大学研究小组需要高纯度的RMP和IKKβ蛋白，用于体外研究，通过表面等离子共振（SPR）、GST下拉实验和ADP-Glo激酶实验，探索两者的相互作用。普健生物（AtaGenix Laboratories Co., Ltd.）受托提供GST、GST-小鼠RMP-WT、GST-小鼠RMP-S439A和His-小鼠IKKβ的定制蛋白表达与纯化服务，确保蛋白质适用于Western blot（WB）验证和功能实验。
技术挑战
1. 蛋白纯度：确保蛋白高纯度，以保证SPR和GST下拉实验结果的准确性。
2. 功能完整性：保持RMP和IKKβ的结构与功能特性，确保激酶和结合实验的可靠性。
3. 突变蛋白表达：生产高质量的RMP-S439A突变体，以研究其与IKKβ的增强结合能力。
定制蛋白解决方案
1. 蛋白表达与纯化：
- 采用优化的大肠杆菌表达系统，表达GST、GST-小鼠RMP-WT、GST-小鼠RMP-S439A和His-小鼠IKKβ。
- 纯化蛋白至高纯度，确保适用于SPR（OpenSPR系统）、GST下拉实验和ADP-Glo激酶实验。
2. 验证与支持：
- 通过WB实验验证蛋白功能，确认蛋白完整性及特异性相互作用。
- 提供技术支持，优化SPR和GST下拉实验中蛋白的表现，确保RMP-IKKβ及RMP-PP2Ab相互作用的精确分析。
高纯度蛋白帮助研究团队确认了RMP通过招募PP2A抑制IKKβ的作用，RMP-S439A突变体显示出与IKKβ的增强结合能力。通过WB验证的蛋白支持了研究结果，进一步揭示了RMP作为脓毒症治疗靶点的潜力。
我们的专业团队提供从蛋白设计到功能验证的全方位支持，助力您的研究在全球产生影响。