鼠抗对氨基苯磺酰胺单抗(1D6 株)的制备遵循半抗原 - 载体偶联 + 杂交瘤技术路线,交叉反应率集中于结构类似的磺胺类药物,对非磺胺类药物交叉率极低,具体如下:
初筛:间接 ELISA 法以检测原包被,筛选上清液中能结合抗原的阳性杂交瘤细胞。
复筛:间接竞争 ELISA 用对氨基苯磺酰胺标准品进行抑制实验,筛选抑制率高、亲和力强的阳性克隆。
克隆化:采用有限稀释法克隆化 3 次,获得稳定分泌抗体的 1D6 杂交瘤细胞株,验证传代 5 代后抗体分泌稳定性。
1D6 株抗体识别对氨基苯磺酰胺的核心表位(苯环 + 磺酰胺基),交叉反应仅发生于共享该核心结构的磺胺类药物,非磺胺类药物无明显交叉。
适用于磺胺类多残留检测(如食品中磺胺嘧啶、磺胺甲恶唑等联合筛查),交叉反应可覆盖多数常见磺胺类药物,无需单独制备多种抗体。
若需特异性检测对氨基苯磺酰胺,需通过优化检测条件(如提高竞争药物浓度、使用高特异性包被抗原),或结合样品前处理(如固相萃取富集目标物)减少交叉干扰。
非磺胺类药物对检测结果无影响,常规检测无需设置此类药物的交叉对照。