产品名称:Cy3 双活性酯
英文名称:Cyanine3 Bis NHS ester
===本文由齐岳生物小编HLL整理编辑===
该试剂是一款双活性酯官能化的红光菁染料,分子核心为 Cy3 红光荧光母体,两端对称连接 NHS 活性酯基团,兼具 Cy3 优异可见光荧光性能与双 NHS 活性酯的高效氨基靶向偶联活性,是双靶点同步标记、多功能探针构建、高活性荧光修饰的核心工具,广泛应用于生物分子修饰、多靶点共定位成像、免疫检测等领域,标记效率与特异性远超单活性酯 Cy3 试剂。Cy3 作为核心红光荧光单元,是生物研究中最经典、应用最广泛的红光染料,激发波长约 550nm,发射波长约 570nm,属于橙红光波段,荧光亮度极高,摩尔消光系数可达 150000 L・mol⁻¹・cm⁻¹,荧光量子产率优异,在常规荧光显微镜下即可清晰检测,无需特殊激发设备,适配多数实验室基础与高端成像需求;光稳定性极佳,耐受多次激光激发,不易发生光漂白,可满足长时间动态成像与高通量检测需求,适配活细胞动态追踪与批量样品检测;
光谱适配性极强,与 Cy5、Alexa Fluor 488、FITC 等染料光谱重叠率极低,是多色荧光成像的理想红光通道选择,可实现多靶点同时标记与区分;水溶性适中,配合双 NHS 活性酯的极性修饰,可在水溶液中稳定分散,避免疏水聚集导致的荧光猝灭,同时生物相容性好,毒性极低,适配活细胞、固定细胞、组织切片、体液等多种生物样品。
两端对称 NHS 活性酯是该分子的核心功能偶联位点,具有超高反应活性与特异性,是氨基靶向修饰的金标准基团,其核心反应特性突出:一是特异性极强,仅与生物分子中的伯氨基(-NH2)发生高效酰化反应,生成稳定不可逆的酰胺键,不与羧基、硫醇、羟基等其他官能团非特异性反应,确保标记精准性,背景干扰极低;二是反应效率极高,NHS 活性酯与氨基的反应速率快,常温下短时间即可完成修饰,修饰率可达 95% 以上,远超常规羧基缩合反应,适配高纯度修饰需求;三是反应条件温和,最佳反应 pH7.2-8.5,无需苛刻催化剂,对抗体、蛋白、多肽、核酸等生物分子的空间构象与生物活性无任何损伤,适配各类生物底物修饰;四是双位点独立反应,两端 NHS 活性酯对称分布,间距适中,由 Cy3 共轭母体分隔,无明显空间位阻,两个位点反应效率互不干扰,均可实现高效修饰,为双位点精准修饰提供核心保障。

双 NHS 活性酯的独特设计赋予分子两大核心优势,一是双靶点同步高效标记,可同时偶联两个相同或不同的含氨基生物分子(如两种特异性抗体、抗体 - 多肽、蛋白 - 核酸),构建双靶向 Cy3 荧光探针,实现双靶点的同步标记与共定位分析,无需分别标记,简化实验步骤,提升实验效率,同时确保双靶点标记的均一性;二是高活性荧光修饰,双 NHS 活性酯的高反应活性可实现低浓度下的高效修饰,适配低丰度、微量生物分子的标记,避免因高浓度试剂导致的生物分子损伤,同时可实现生物分子的多位点修饰,提升荧光负载量,增强荧光信号强度,适配低表达靶点的检测。
其应用场景丰富且实用性极强,在双靶点共定位成像中,两端 NHS 活性酯分别偶联两种不同特异性抗体,构建双靶向 Cy3 荧光探针,同时标记细胞内两个目标蛋白,通过红光信号清晰观察双靶点的空间分布、共定位关系与动态关联,适配肿瘤相关蛋白共表达、细胞骨架与信号蛋白相互作用、受体 - 配体结合等研究;在免疫检测中,作为高活性荧光标记试剂,标记抗体、抗原用于 ELISA、免疫印迹、流式细胞术等检测,荧光信号强、标记效率高,大幅提升检测灵敏度与重复性,适配微量生物分子的定量分析;在多功能探针合成中,作为核心红光荧光砌块,两端 NHS 活性酯分别偶联靶向基团、治疗基团、点击化学基团,构建 “靶向 - 成像 - 治疗” 一体化探针,简化合成流程,提升探针集成化功能;在核酸修饰中,双 NHS 活性酯与核酸氨基修饰位点偶联,实现核酸双位点荧光修饰,提升核酸探针的稳定性、靶向结合能力与荧光亮度,适配荧光原位杂交、核酸适配体靶向示踪等;此外,还可用于纳米载体高活性修饰,双 NHS 活性酯高效偶联纳米载体表面氨基,实现高密度荧光修饰,提升纳米材料的红光示踪能力,适配药物递送系统的精准示踪。
小编:HLL 2025年12月31日