引物或探针降解后无法修复，唯一的补救措施是重新合成高质量的引物或探针，并优化储存条件以防止再次降解。
一旦确认引物或探针已降解（如通过PAGE电泳显示条带模糊、拖尾或弥散），原有试剂已失去特异性结合能力，无法参与有效扩增，必须更换新批次。为避免后续实验受影响，建议采取以下措施：
1、重新合成与质量把关
选择信誉良好的供应商，确保引物纯度（如HPLC或PAGE纯化级别）。
合成后立即进行质量验证：使用PAGE电泳或毛细管电泳检测完整性，确认无降解；通过OD260/280比值评估纯度（理想值1.8–2.0），排除蛋白或有机溶剂污染。
2、优化储存方式
分装保存：将引物或探针小量分装，避免反复冻融导致的物理损伤。
储存浓度：引物储存浓度不应低于10 μM，推荐以100 μM储备液形式存放，提高稳定性。
溶剂选择：使用含0.1 mM EDTA的TE缓冲液（pH 8.0）溶解，比纯水更稳定，可螯合金属离子抑制核酸酶活性。
温度控制：短期存放于–20℃，长期建议–80℃冷冻，避免置于自动除霜冰箱中。
3、使用过程中的注意事项
工作液现用现配，避免在室温下长时间暴露。
操作时佩戴手套，防止外源核酸酶污染。
使用无核酸酶的离心管和枪头，确保体系洁净。