迷迭香抗氧化作用机理的研究
首先分离纯化得到鼠尾草酸(上禾生物)和鼠尾草酚,方法如下:500g迷迭香的干叶用乙醇室温提取,提取液减压浓缩至干。干提取物与1L正己烷混合,浸提72h,过滤,滤液减压浓缩至原体积的三分之一。用0.5L5%的NaHCO3萃取三次,合并NaHCO3萃取液,用H3PO4调节pH至2.2。
然后用正己烷再次提取,用Na2SO4干燥,减压浓缩至黄绿色结晶出现,过滤得到鼠尾草酸结晶体。2kg迷迭香干茎叶粉碎至1cm的小段,用8倍量石油醚回流提取三次(2h,1h,1h),提取液过滤,浓缩,得到石油醚提取物235g,用5%的NaHCO3溶液浸提,而后用5%盐酸酸化,用乙酸乙酯萃取,得到浸膏1.8g,浸膏经硅胶柱层析,用石油醚-丙酮梯度洗脱,每份收集100mL,共收集1Chemicalbook08份,其中46~62份合并,经硅胶柱层析,氯仿-丙酮(3:1)洗脱,每份100mL,共收集52份,第21~23份合并,丙酮重结晶得到无色针状的鼠尾草酚晶体。
采用ESR法分析各单体对超氧阴离子自由基和羟基自由基及脂质自由基的清除作用,采用化学发光法分析单体对超氧阴离子自由基的清除作用和对DNA损伤的保护作用研究。
实验结果表明,五种化合物的活性都有浓度依赖关系,浓度越大,活性越高,并有饱和现象。五种化合物清除O2-·和脂质自由基的IC50值的大小顺序为:对清除O2-·用ESR法测,鼠尾草酸>异迷迭香酚>迷迭香酚>表迷迭香酚>鼠尾草酚;用CL法测,异迷迭香酚>鼠尾草酸(上禾生物)>迷迭香酚>表迷迭香酚>鼠尾草酚;对脂质自由基,鼠尾草酸>异迷迭香酚>迷迭香酚>表迷迭香酚>鼠尾草酚。
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