一、背景介绍
N6-甲基腺嘌呤（m6A）是真核生物 RNA 分子上最常见、丰度最高的修饰，在原核生物和病毒中也有发现。近年来，在多细胞真核生物和病毒中也有发现。近年来，在多细胞真核生物（如秀丽隐杆线虫和黑腹果蝇）以及高等真核生物（包括植物、小鼠和人类细胞）的 DNA 中也鉴定出 m6A 修饰。m6A 在 DNA 复制、DNA 损伤、RNA 剪接、转座、转录及细胞防御等过程中发挥关键调控作用。
在人类细胞中，m6A 修饰由 METTL3/14、WTAP、RBM15/15B 和 KIAA1429 等甲基转移酶（写入器）催化，并由 FTO、ALKBH5 和 TET 样酶等依赖 α-酮戊二酸（α-KG）和 Fe²⁺ 的去甲基化酶（擦除器）移除。研究表明，m6A 甲基化酶和去甲基化酶在发育、代谢，生育等多种生物学过程中发挥重要作用，并参与癌症和病毒感染等多种疾病的发病机制。DNA/RNA 上动态可逆的 m6A 化学修饰液可能作为一种具有深远生物学意义的新型表观遗传标记。m6A修饰上调可促进病毒复制和肿瘤生长，而其下调则最早在人类癌细胞和组织中相对于正常对照被表征。
二、产品概述
由艾美捷代理Epigentek推出的Epigenase m6A 甲基化酶活性/抑制检测试剂盒（比色法）（货号：P-9019）是一套完整的优化缓冲液和试剂组合，专为利用核提取物或纯化 m6A 甲基化酶（如 METTL3/METTL14）检测总 m6A 甲基化酶（甲基转移酶）的活性/抑制作用而设计。适用物种广泛，包括哺乳动物，植物，真菌和细菌，样本形式包括但不限于培养细胞，新鲜及冷冻组织，该试剂盒具有以下优势与特点：
快速：比色法操作步骤简单，整个流程可在4小时内完成
稳健：创新的试剂组成使其背景信号极低，确保检测简单、准确、可靠且一致
便捷：细胞/组织核提取物和纯化蛋白均可使用，支持在体内和体外检测m6A甲基化酶抑制剂的抑制效果
灵敏且特异：新颖的检测原理可检测m6A甲基化酶转化的终产物，较副产物检测法更具特异性，同时实现高灵敏度，最低可检测2 µg 核提取物或 50 ng 纯化酶。
定量：试剂盒包含检测标准品，可对 m6A 甲基化酶比活性进行定量。
灵活：条板微孔格式，适用于手动或高通量分析。
三、原理与操作流程
本试剂盒用于检测总 m6A 甲基化酶活性/抑制作用。实验中，独特的 m6A 底物被稳定包被于条板孔中，活性 m6A 甲基化酶与底物结合并使其中的 m6A 发生甲基化。底物中未被去甲基化的 m6A 可被高亲和力 m6A 抗体识别，免疫信号经增强液放大。未去甲基化 m6A 的比例或量与酶活性成反比，可通过类似 ELISA 的反应进行比色定量。
四、起始材料
输入材料可为核提取物或纯化酶。每次检测所需核提取物用量为 2 µg 至 20 µg，最佳范围为 5 µg 至 10 µg。纯化 m6A RNA 甲基化酶用量为 20 ng 至 1 µg，最佳范围为 50 ng 至 500 ng，具体取决于酶的纯度和催化活性
五、文献参考
Sun M et. al. (August 2026). METTL7A Downregulation Drives SLC1A5-Mediated Glutamine Competition to Promote Tumor Proliferation and Suppress CD8 T Cell Immunity in Gastric Cancer. Adv Sci (Weinh). :e76963. PubMed: 42544900
Sharma G et. al. (September 2025). IGF2BP3 redirects glycolytic flux to promote one-carbon metabolism and RNA methylation. Cell Rep. :116330.
Miller C et. al. (April 2025). Pathological α-synuclein dysregulates epitranscriptomic writer METTL3 to drive neuroinflammation in microglia. Cell Rep. 44(5):115618.
Li D et. al. (March 2025). MAZ-mediated N6-methyladenosine modification of ZEB1 promotes hepatocellular carcinoma progression by regulating METTL3. J Transl Med. 23(1):265.
Zhang X et. al. (November 2024). RNA m6A methylation regulatory mechanism of resveratrol in premature senescence cells. Food Sci Nutr. 12(11):9238-9251.