一、产品定位与核心用途
由艾美捷代理Epigentek推出的MethylFlash 甲基化DNA 5-mC定量试剂盒(比色法)(货号 P-1034)是一款用于DNA甲基化研究领域的即用型比色检测试剂盒,核心功能是通过类似ELISA的微孔板格式,特异性测定全球DNA甲基化水平,即5-甲基胞嘧啶(5-mC)的含量。该试剂盒以DNA为输入样本,适用于绝对定量与相对甲基化状态计算,采用96孔板格式,可在4小时内完成全部实验流程,兼容手动与高通量分析。
二、技术背景与检测原理
与LUMA、LINE-1、Alu及LTR等基于重复序列的间接评估方法相比,MethylFlash技术直接定量实际的全球DNA甲基化水平,结果更具代表性。该试剂盒还可与MethylFlash羟甲基化DNA定量试剂盒(比色法)配对使用,实现甲基化DNA与羟甲基化DNA的同步定量。
检测原理为:DNA结合于经特殊处理、具有高DNA亲和力的条孔中,甲基化DNA片段被捕获抗体和检测抗体识别,随后通过类似ELISA的显色反应,在450 nm波长下读取吸光度。甲基化DNA的量与OD值成正比,用户可依据试剂盒提供的公式计算两个样本的相对甲基化状态,或通过标准曲线对5-mC进行绝对定量。
三、关键性能优势
1. 直接定量全球甲基化:相比LUMA或LINE-1等间接方法,本试剂盒直接测定实际5-mC水平,数据更真实可靠。
2. 高灵敏度:检测下限低至0.2 ng甲基化DNA,可接受低至50 ng的基因组DNA输入。
3. 高特异性:优化的抗体与增强液体系可特异性识别5-mC,不与未甲基化胞嘧啶发生交叉反应,在样本DNA浓度范围内对羟甲基胞嘧啶的交叉反应可忽略。
4. 极低背景:创新的试剂盒组分使背景信号极低,省去了传统方法中的平板干燥与封闭步骤,操作更简便、结果更稳定。
5. 快速灵活:全程4小时内完成,条孔式微孔板设计支持手动或高通量分析。
6. 通用对照:包含通用阳性与阴性对照,适用于哺乳动物、植物、真菌、细菌及病毒等任何物种的甲基化DNA定量。
7. 安全经济:无需DNA消化/变性、放射性、提取或色谱步骤,相比HPLC或质谱法更具成本效益。
四、应用场景
该试剂盒适用于全球DNA甲基化水平检测、表观遗传学研究、疾病相关甲基化标志物筛选、药物处理后的甲基化变化评估以及跨物种甲基化比较分析。其与羟甲基化定量试剂盒的配对设计,尤其适合需要同时评估两种修饰的研究场景。
五、总结
MethylFlash 甲基化DNA 5-mC定量试剂盒以直接定量、高灵敏度、高特异性和极低背景为核心优势,为全球DNA甲基化研究提供了快速、安全且经济的解决方案。其通用对照体系与灵活的通量设计,使其成为表观遗传学实验室中值得优先考虑的工具。
六、文献参考
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