由艾美捷代理Epigentek推出的EpiQuik 组蛋白甲基转移酶活性/抑制检测试剂盒(H3K4)(货号 P-3002)是一款专为检测组蛋白甲基转移酶(HMT)活性而设计的即用型工具。该试剂盒适用于核提取物或纯化酶样本,可特异性测量靶向组蛋白 H3 第 4 位赖氨酸(H3-K4)的甲基转移酶活性或抑制作用,广泛应用于表观遗传学领域的组蛋白甲基化研究。
试剂盒组分
组分 | 48 次检测(P-3002-1) | 96 次检测(P-3002-2)
HM1(10× 洗涤缓冲液) | 11 ml | 22 ml
HM2(组蛋白检测缓冲液) | 1.5 ml | 3 ml
HM3(Adomet / 腺苷甲硫氨酸)* | 25 μl | 50 μl
HM4(生物素化底物,25 μg/ml)* | 100 μl | 200 μl
HM5(HMT 标准品,10 μg/ml)* | 10 μl | 20 μl
HM6(捕获抗体,100 μg/ml)* | 25 μl | 50 μl
HM7(检测抗体,200 μg/ml)* | 10 μl | 20 μl
HM8(显色液) | 6 ml | 12 ml
HM9(终止液) | 3 ml | 6 ml
对照酶(200 μg/ml)* | 5 μl | 10 μl
8 孔检测条(带框架) | 6 | 12
* 为确保最大程度回收产品,请在融化后、开盖前对原装离心管进行短暂离心。
核心优势
本试剂盒采用 96 孔板格式,操作便捷,无需放射性同位素、萃取或色谱步骤,即可在 3 小时内完成检测。其核心优势包括:检测流程快速高效;采用安全的创新型比色法;可特异性测定 H3-K4 甲基转移酶的活性或抑制效果;条带式微孔板设计支持手动或高通量分析,灵活性强;实验条件简单、可靠且重复性好。试剂盒提供全部必需组分,并附有 6 个月质量保证。
检测原理
在检测原理上,该试剂盒将组蛋白底物稳定捕获于条孔中。HMT 酶利用 Adomet 作为甲基供体,将甲基基团转移至组蛋白 H3 底物的第 4 位赖氨酸上。随后,高亲和力抗体特异性识别甲基化的 H3-K4,再通过 HRP 偶联二抗显色系统进行定量。甲基化 H3-K4 的生成量与酶活性成正比,由此可准确计算 HMT 的活性水平。该方案无需特殊设备,操作简便,适合常规实验室开展组蛋白甲基化相关研究。
运输与储存
本试剂盒分两部分运输:一部分在常温下运输,另一部分在 4°C 条件下用冰袋冷冻运输。
收到试剂盒后:(1) 将 HM3、HM4、HM5、HM7 及对照酶储存于 −20°C,避光保存;(2) 将 HM9 储存于室温,避光保存;(3) 其余所有组分储存于 4°C,避光保存。在正确储存条件下,试剂盒自发货之日起可稳定保存长达 6 个月。
注意:使用前请检查洗涤缓冲液 HM1 是否含有盐类沉淀。若有沉淀,请加温(室温或 37°C)并振荡缓冲液,直至盐类重新溶解。
文献引用
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