由艾美捷代理Hycult推出的C3b/iC3b/C3c 小鼠单克隆抗体 3/26（货号 HM1078）是一款特异性识别小鼠补体活化 C3 片段 C3b、iC3b 和 C3c 的单克隆抗体，适用于流式细胞术、冷冻切片、功能研究、免疫检测、免疫荧光及 Western blot 等多种应用场景，广泛服务于感染性疾病、肾脏病学及神经系统疾病等研究领域。
背景信息
补体系统是先天免疫的重要组成部分。第三补体成分 C3 是经典途径、旁路途径和凝集素途径补体激活的核心分子。C3 是补体系统中含量最丰富的蛋白，血清水平约为 1.3 mg/ml。经特定酶蛋白水解后，C3 被裂解为 C3a 和 C3b。C3b 与免疫复合物结合，并进一步被裂解为 iC3b、C3c、C3dg 和 C3f。补体级联反应的活化产物含有天然单一组分中不存在的 neo 表位。
C3 的合成具有组织特异性，并受多种刺激因素调控。遗传性 C3 缺陷使个体易频繁遭受细菌感染。在溃疡性结肠炎及特发性慢性炎症性肠病中，已有报道称病变黏膜存在 C3 沉积。
单克隆抗体 3/26 优先识别裂解后的 C3 片段 C3b、iC3b 和 C3c。
在急性炎症反应中，大量 C3 被加工为 3/26 所识别的产物，因此可作为炎症反应的标志物。在慢性炎症状态下，3/26 可能仅观察到极低的反应性。此类情况下，炎症部位主要残留 C3dg 产物（C3c 已被清除），而抗体 3/26 并不识别 C3dg。慢性状态下 C3 的加工/激活在较低水平进行，从而降低了 C3b、iC3b 和 C3c 片段的检出。
应用与操作说明
流式细胞术（FC）：抗体 3/26 可对沉积于细胞表面的 C3 片段进行染色。阳性对照采用脾细胞，阴性对照采用同型对照大鼠 IgG2a。（参考文献 1）
Western blot（W）：采用非还原样品处理及 SDS-PAGE，条带大小约为 185 kDa。（参考文献 1）封闭使用脱脂奶粉，与培养上清（1:10）室温孵育 1 小时。
冷冻切片免疫组化（IHC-F）：组织切片经丙酮固定，并在室温下用含 3% 过氧化氢的甲醇预处理以淬灭内源性过氧化物酶。阳性对照采用经抗肾小球基底膜抗体处理的小鼠肾脏，阴性对照采用 C3 基因敲除小鼠肾脏。（参考文献 1）
功能研究（FS）：单克隆抗体 3/26 以剂量依赖性方式抑制小鼠补体的溶血活性。该抗体的生物学活性可定义为抑制溶血所需的抗体量。（参考文献 1）
使用建议
用于免疫组化、流式细胞术和 Western blot 时，所用稀释度取决于所采用的检测系统。建议用户自行测试试剂并确定最佳稀释度，典型起始工作稀释度为 1:50。用于功能研究时，体外稀释度需在用户实验体系中优化。
阳性对照：酵母聚糖活化的小鼠血清
阴性对照：C3 基因敲除小鼠
产品规格
产品类型：单克隆抗体
规格：100 µg、20 µg
剂型：0.2 ml（100 µg/ml）经 0.2 µm 过滤的抗体溶液，溶于 PBS，含 0.1% 牛血清白蛋白
同型：大鼠 IgG2a
种属：小鼠
别名：Complement C3；ASP；Plp；HSE-MSF；AI255234
储存与稳定性：产品应储存于 4°C。在推荐储存条件下，产品至少稳定一年，具体有效期见标签标示。
注意事项
本产品仅供研究使用，不得用于人或动物体内，亦不得用于诊断。
相关疾病领域
感染性疾病、肾脏病学、神经系统疾病。