鸡/Chicken IgM ELISA试剂盒是一种高灵敏度的双位点酶联免疫测定法(ELISA),用于测量鸡生物样品中的IgM。如果ELISA在预期用途之外使用,用户可能需要优化saiduse。
仅用于研究。非诊断用途。仅限体外使用。
当按照包装内说明书中的信息完全理解并遵循实验程序,以及遵守良好的实验室操作规范时,将获得可靠和可重复的结果。可能影响实验性能的因素包括仪器功能、玻璃器皿的清洁度、蒸馏水或去离子水的质量、试剂和样品移液的准确性、洗涤技术、孵化时间和温度。不要将不同批次或来源的试剂混合或替换使用。
艾美捷鸡/Chicken IgM ELISA试剂盒(E-30M)组件:
盒子标签上注明了试剂盒及其组件的有效期。如果按照本试剂盒协议插入件进行储存和使用,则所有成分应在有效期内有效。
样本稀释:
实验要求在使用前对每个待测样本进行稀释。每次进行实验时,所有样本都应以双份进行检测。推荐的稀释比例仅为建议。稀释应基于未知样本预期的浓度,以便稀释后的样本落在标准曲线的动态范围内。如果不确定样本水平,强烈建议在运行整个板之前,对一个或两个代表性样本进行系列稀释。
血清样本:推荐的起始稀释比例是1/2,000。要准备1/2,000的样本稀释,将5 µL的样本转移到495 µL的1X稀释液中。这会得到1/100的稀释。接下来,通过将20 µL转移到380 µL的1X稀释液中,将1/100稀释,得到1/2,000的稀释。每个阶段都要彻底混合。
血浆样本:推荐的起始稀释比例是1/2,000。要准备1/2,000的样本稀释,将5 µL的样本转移到495 µL的1X稀释液中。这会得到1/100的稀释。接下来,通过将20 µL转移到380 µL的1X稀释液中,将1/100稀释,得到1/2,000的稀释。每个阶段都要彻底混合。
试剂准备:
将所有试剂在使用前放置至室温(16°C至25°C)。
稀释液浓缩物:提供的稀释液是5X浓缩物,必须用蒸馏水或去离子水(1份缓冲液浓缩物,4份dH2O)稀释1/5。
洗涤液浓缩物:提供的洗涤液是20X浓缩物,必须用蒸馏水或去离子水(1份缓冲液浓缩物,19份dH2O)稀释1/20。当储存温度较低时,浓缩物中可能会形成晶体。在稀释前将浓缩物加热至30-35°C可以溶解晶体。
酶-抗体结合物:通过向每个微孔板测试条添加10 µL酶-抗体结合物和990 µL的1X稀释液,计算每个微孔板测试条所需的工作结合物溶液量。使用前立即稀释,并避光保护。均匀但轻柔地混合,避免产生泡沫。
预包被的ELISA微孔板:按提供的状态使用。揭开箔袋,从袋中取出微孔板。移除在实验中不会使用的所有条带和孔,并将它们连同干燥剂一起放回袋中并重新密封。
鸡IgM校准物:根据特定的批次分析证书准备。
结果计算:
从每个样本的测试值中减去平均背景值(标准零的平均吸光度读数)。
对每个标准品的双份读数取平均值,并使用这些结果构建标准曲线。通过使用能够生成四参数逻辑曲线拟合的计算机软件来减少数据来构建标准曲线。也可以使用二阶多项式(二次)或其他曲线拟合;然而,它们对数据的拟合将不够精确。
从标准曲线上插值测试样本值。校正血清稀释因子,以得出原始样本中的IgM浓度。
https://www.amyjet.com/products/E-30M.shtml