一、产品概述

由艾美捷代理Bethyl Laboratories推出抗PBRM1（BAF180）多克隆抗体（货号：A301-591A）为兔源抗人/小鼠PBRM1（polybromo 1，又称BAF180）蛋白C端区域（第1639–1689位氨基酸之间）的特异性多克隆抗体。PBRM1是哺乳动物SWI/SNF染色质重塑复合物中PBAF亚型的核心亚基，含有六个溴结构域（bromodomains），能够识别组蛋白乙酰化信号，在转录调控、DNA损伤应答及细胞周期检查点控制中发挥关键作用。该蛋白已被证实是一种肿瘤抑制因子，其突变在肾癌等多种肿瘤中高频出现。本抗体经抗原亲和纯化，适用于流式细胞术（Flow Cyt）、免疫组化（IHC）、免疫沉淀（IP）及免疫印迹（WB）等多种应用，是研究染色质重塑与肿瘤发生机制的有力工具。

二、详细规格

参数 | 规格

靶标 | PBRM1（polybromo 1）

反应种属 | 小鼠、人

应用 | Flow Cyt, IHC, IP, WB

宿主 | 兔

克隆性 | 多克隆

形式 | 全IgG

免疫原 | 人PBRM1第1639位至C端之间的区域（具体表位位于1639-1689位氨基酸）

抗体类型 | IgG

偶联物 | 未偶联

纯度 | 抗原亲和纯化

抗原种属 | 人

浓度 | 1000 ug/ml（1 mg/ml）

储存温度 | 2 - 8 °C

有效期 | 自收货之日起1年

缓冲液 | Tris-柠檬酸-磷酸缓冲液，pH 7-8，含0.09% 叠氮钠

三、产品制备

本抗体采用固相载体固定的PBRM1特异性表位进行亲和纯化。免疫原对应人PBRM1（GenBank登录号AAP34197.1，GeneID 55193）第1639至1689位氨基酸之间的区域，该区域靠近蛋白C端，序列在哺乳动物中高度保守。抗体经亲和层析后，免疫球蛋白浓度通过比尔定律测定（1 mg/ml IgG在280 nm处吸光度为1.4）。

四、推荐应用与实验条件

所有Western blot实验建议使用5%脱脂牛奶-TBST作为封闭液和抗体稀释液，一抗孵育条件为4°C过夜。以下为各应用的推荐起始条件：

应用 | 推荐用量/稀释度 | 备注

Western Blot (WB) | 1:2000 – 1:10000 | 检测细胞裂解液时，二抗推荐山羊抗兔IgG（H+L）（货号A120-101P）；检测免疫沉淀物时，二抗建议使用抗兔IgG轻链HRP偶联抗体，并在封闭液中加入5%正常猪血清（货号S100-020）以消除重链干扰。

Immunoprecipitation (IP) | 6 ug/mg 裂解物 | 每毫克总蛋白使用6 ug抗体（即1 mg裂解物加6 ul原液）。推荐与Protein A/G磁珠或琼脂糖珠孵育2–4小时或过夜。

Immunohistochemistry (IHC) | 1:1000 – 1:5000 | 对福尔马林固定石蜡包埋（FFPE）组织切片，推荐使用pH 6.0枸橼酸盐缓冲液进行热诱导抗原修复。建议同时进行不含一抗的阴性对照。

Flow Cytometry (Flow Cyt) | 1 ul / 1×10⁶ 细胞 | 细胞先用4%甲醛固定，再用90%甲醇透化。每1×10⁶细胞加入1 ul抗体（即1:1000稀释，假设反应体积100 ul）。建议使用荧光标记二抗（如FITC或Alexa Fluor 488）。

五、背景信息

PBRM1是SWI/SNF-B（PBAF）复合物的专属亚基（区别于含BRD7的BAF复合物）。该复合物利用ATP水解产生的能量滑动或驱逐核小体，促进转录因子与DNA结合，调控基因表达。PBRM1的已知功能包括：

1. 转录共激活/抑制：参与干扰素应答、核激素受体信号通路等。

2. DNA损伤应答：在DNA损伤后，PBRM1促进p21（CDKN1A）的转录，诱导细胞周期停滞，防止损伤基因组复制。

3. 肿瘤抑制：PBRM1基因在透明细胞肾细胞癌（ccRCC） 中的突变频率仅次于VHL，约30-40%的ccRCC存在PBRM1失活突变。此外，在胆管癌、乳腺癌等中也发现其突变或表达下调。

六、储存与稳定性

储存条件：2 - 8°C，严禁冷冻。冷冻会导致蛋白聚集和活性丧失。

有效期：自收货之日起1年，在2-8°C未稀释条件下保存。

运输条件：冰袋冷藏运输，收货后请立即存放于2-8°C。

防腐剂：缓冲液含0.09%叠氮钠，可抑制细菌生长。如需进行活细胞实验或无叠氮操作，请通过透析或脱盐柱去除叠氮钠。

七、典型实验结果预期

Western Blot：在HEK293全细胞裂解液中，1:5000稀释抗体可检测到一条约180–200 kDa的条带；在PBRM1敲除细胞中该条带消失。

Immunoprecipitation：使用6 ug抗体/mg裂解物可从HeLa细胞核提取物中捕获PBRM1及其结合蛋白（如BRG1、ARID2等PBAF组分）。

IHC：人肾透明细胞癌组织中PBRM1染色缺失（阴性），而癌旁正常肾小管上皮细胞核强阳性。

Flow Cytometry：固定透化后的Jurkat细胞经1 ul/106细胞染色，流式直方图显示明显的荧光峰右移。

仅限科研使用：不得用于临床诊断、治疗或人体实验。