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碘化丙啶

MCE 国际站：Propidium Iodide

品牌：MedChemExpress (MCE)

货号：HY-D0815

CAS：25535-16-4

中文名称：碘化丙啶

Synonyms：碘化丙啶

纯度：99.69%

存储条件：4°C, sealed storage, away from moisture and light *In solvent : -80°C, 2 years; -20°C, 1 year (sealed storage, away from moisture and light)

运输条件：美国大陆的室温；其他地方可能有所不同。

产品活性：Propidium Iodide (PI) 是一种细胞核染色试剂，可染色 DNA。Propidium Iodide 是一种溴化乙啶的类似物，在嵌入双链 DNA 后释放红色荧光。Propidium Iodide 不能通过活细胞膜，但却能穿过破损的细胞膜而对核染色。Propidium Iodide 的荧光波长为 493/617 nm,与 DNA 嵌合后波长为 536/635 nm。Propidium Iodide 常用于细胞凋亡 (apoptosis) 或细胞坏死 (necrosis) 的检测，常用于流式细胞仪分析。

生物活性：碘化丙锭是一种红色荧光染料，可用于对细胞进行染色。 体外：碘化丙啶是一种细胞膜不可渗透的染料，其特征激发最大值为 535 nm，发射最大值为 617 nm，可嵌入具有一种染料化学计量的核酸每 4-5 个碱基对，几乎没有序列偏好。碘化丙啶已证明对神经元没有毒性作用，是当今最常见的膜完整性和细胞活力标记物，在固定前使用（固定前碘化丙啶染色法）。预固定染色已广泛用于定量评估急性神经变性模型中的神经元细胞衰退，可视化为退化神经元的强标记 PI⁺-致密核^{[1]。碘化丙锭不能穿过活细胞的细胞膜，因此可用于通过流式细胞术分析测量凋亡细胞的百分比。流式细胞术数据显示与电泳和比色法获得的结果具有极好的相关性。事实证明，这种快速、简单且可重复的新方法可用于评估异质组织（如骨髓、胸腺和淋巴结）中特定细胞群的凋亡[2]。}

体外：使用方法1.1 制备储存液用 DDH2O 配制 1 mg/mL 储备液。1.2 工作液的配制用预热好的无血清细胞培养基或 PBS 稀释储存液，配制成 20-50 μg/mL 的 Propidium Iodide 工作液。注：请根据实际情况调整 Propidium Iodide 工作液浓度，且现用现配。 2. 细胞染色（悬浮细胞）2.1 离心收集细胞，加入 PBS 洗涤两次，每次 5 分钟。细胞密度在 1×106/mL。2.2 加入 1 mL 工作液，室温孵育 5-10 分钟。2.3 400 g，离心 3-4 分钟，弃去上清。2.4 加入 PBS 洗涤细胞两次，每次 5 分钟。2.5 用 1 mL 无血清培养基或 PBS 重悬细胞后，使用荧光显微镜或流式细胞仪进行观察。 3. 细胞染色（贴壁细胞）3.1 将贴壁细胞培养于无菌盖玻片上。3.2 从培养基中移出盖玻片，吸除多余培养基。3.3 加入 100 μL 染料工作液，轻轻晃动使其完全覆盖细胞，孵育 5-30 分钟。3.4 吸去染料工作液，用培养基洗 2-3 次，每次 5 分钟，使用荧光显微镜观察。注：若需要用流式细胞仪检测，需将细胞用胰蛋白酶消化重悬后再进行染色。 保存条件-20℃ 避光保存一年 注意事项1.请根据实际情况调整 Propidium Iodide 工作液浓度与孵育时间。2.本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品。3.Propidium Iodide 具有致癌性，为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 MCE尚未独立证实这些方法的准确性。仅供参考。

细胞实验：流式细胞分析：碘化丙啶在 0.1% 柠檬酸钠和 0.1% Triton X-100（50 μg/mL）中制备。将 200 ×g 离心后的细胞沉淀轻轻地悬浮在 12×75 聚丙烯管中的 1.5 mL 低渗荧光染料溶液（碘化丙啶 50 μg/mL）中。在进行流式细胞分析之前，将管子置于 4°C 黑暗环境中过夜。使用 FACScan 流式细胞仪测量单个细胞核的碘化丙啶荧光。细胞核穿过 488 nm 氩激光的光束。使用 560 nm 二向色透镜 (DM 570) 和 600 nm 带通滤光片 (带宽 35 nm) 收集由于碘化丙啶染色 DNA 而产生的红色荧光，并以对数刻度记录数据[2]。MCE 尚未独立证实这些方法的准确性。它们仅供参考。

Emission (Em)：615

Excitation (Ex)：535

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参考文献：

[1]. Hezel M, et al. Propidium iodide staining: a new application in fluorescence microscopy for analysis of cytoarchitecture in adult and developing rodent brain. Micron. 2012 Oct;43(10):1031-8.
[2]. Nicoletti I, et al. A rapid and simple method for measuring thymocyte apoptosis by propidium iodide staining and flow cytometry. J Immunol Methods. 1991 Jun 3;139(2):271-9.
[3]. A rapid and simple method for measuring thymocyte apoptosis by propidium iodidestaining and flow cytometry. J Immunol Methods. 1991 Jun 3;139(2):271-9.