苹果酸合酶(MS)测定试剂盒/分光光度法/48T
测定意义:
苹果酸合酶(MS ,EC 4.1.3.2 )是属于转移酶中酰基转移酶的一类,主要存在于植物和微生物中。MS 是乙醛酸循环的关键酶之一,在 MS 催化下乙醛酸与乙酰辅酶 A 反应生成苹果酸。
测定原理:
MS 催化乙酰 CoA 和乙醛酸产生苹果酸,同时生成辅酶 A,辅酶 A 使无色的 DTNB 转变成黄色的 TNB,在 412nm 处有特征吸光值。
自备仪器和用品:
分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵、冰、和蒸馏水。测定步骤:
1、分光光度计预热 30min 以上,调节波长至 412nm,蒸馏水调零。
2、样本测定
在 1mL 玻璃比色皿中依次加入 100 μ L 样本、400 μ L 试剂二,400 μ L 试剂三和 100 μ L 试剂四,混匀,立即记录 412 nm 处反应 5min 时的吸光值 A1 和 10min 时的吸光值 A2,计算Δ A=A2-A1。
注 意:
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测。
上海酶联生物科技有限公司
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