γ-谷氨酰半胱氨酸连接酶(GCL)测定试剂盒/比色法/24样 新品

γ-谷氨酰半胱氨酸连接酶(GCL)测定试剂盒/比色法/24样

测定原理：

在 ATP 和 Mg2+存在下，GCL 催化谷氨酸和半胱氨酸合成γ-谷氨酰半胱氨酸；同时 ATP 分解产生无机磷，通过测定无机磷增加速率，即可计算出 GCL 活性。

自备仪器和用品：

低温离心机、可见分光光度计、水浴锅、1mL 玻璃比色皿、浓硫酸、蒸馏水。

测定步骤：

1.  分光光度计预热 30min   以上，调节波长到 660nm，用蒸馏水调零；

2.  空白管：

（1）依次加入双蒸水 120 μL 、试剂一 240 μL 、试剂二 260μL 和试剂三 60 μL，混匀后盖紧，37 °C 水浴准确反应 15 分钟；

（2）加入试剂四 300 μ L，混匀后，室温（25 °C 左右）下 10000rpm 离心 10 分钟，取上清 500 μ L 待测；

（3）加入试剂五 500 μ L ，混匀后盖紧，45 °C 水浴 10 分钟，冷却后测定 660nm 处吸光率，对大量样品，空白管只需做 1-2 个。

注 意：
吸光率需在水浴完成后尽快测定完成。