锰过氧化物酶(Manganese peroxidase,Mnp)试剂盒说明书
分光光度法 50 管/48 样
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
锰过氧化物酶(EC1.11.1.13)是一种含亚铁血红素的过氧化物酶,主要存在于担子菌中,属于木质素 降解酶系,能有效的降解木质素及废水和土壤中比较难降解的氯化物,叠氮化合物、DTT,多环芳烃等。
测定原理:
锰过氧化物酶在 Mn 2+存在的条件下,将愈创木酚氧化为四邻甲氧基连酚,在 465nm 有特征吸收峰。
需自备仪器和用品:
天平、研钵、低温离心机、可见分光光度计、1 ml 玻璃比色皿、恒温水浴锅。
酶液提取:
1、组织:按照质量(g):试剂一体积(ml)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g,加入 1ml 试剂一) 加入试剂一,冰浴匀浆后于 4℃,10000g 离心 10min,取上清置于冰上待测。
2、细胞:按照细胞数量(104 个):试剂一体积(ml)为 500~1000:1 的比例(建议 500 万细胞加入 1ml 试剂一),冰浴超声波破碎细胞(功率 300w,超声 3 秒,间隔 7 秒,总时间 3min);然后 4℃,10000g 离心 10min,取上清置于冰上待测。 3、培养液或其它液体:直接检测。
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