超氧阴离子(OFR)检测试剂盒(分光光度法50T/48S)

超氧阴离子(Oxygen free radical, OFR)试剂盒说明书 

分光光度法 50 管/48 样

正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定 

测定意义：

生物体内超氧阴离子等活性氧具有免疫和信号传导的作用，但积累过多时会对细胞膜及生物大分子产 生破坏作用，导致机体细胞和组织代谢异常，从而引起多种疾病。 

测定原理：

超氧阴离子与盐酸羟胺反应生成 NO2－，NO2－在对氨基苯磺酸和α－萘胺的作用下，生成红色的偶氮化 合物，在 530nm 处有特征吸收峰，根据ΔA 值可以计算样品中 O2－含量，反应式为 NH2OH + 2O2－ ＋H ＋ → NO2－ ＋ H2O2 ＋ H2O。

自备仪器和用品： 

天平、水浴锅、离心机、可见分光光度计、1 ml 玻璃比色皿、氯仿和蒸馏水。

超氧阴离子提取： 

1、植物、动物组织：按照组织质量（g）：提取液体积(ml)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织， 加入 1ml 提取液）进行冰浴匀浆，然后 10000g，4℃，离心 20min，取上清置于冰上待测。。

2、细菌、真菌：按照细胞数量（10 4个）：提取液体积（ml）为 500~1000：1 的比例（建议 500 万细 胞加入 1ml 提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率 300w，超声 3 秒，间隔 7 秒，总时间 3min）；然后 10000g， 4℃，离心 20min，取上清置于冰上待测。

3、血清或培养液：直接测定。